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【題目】為探究NaCl和CuSO4對唾液淀粉酶活性的影響,某同學進行了實驗,實驗步驟和結果見表。請回答:

(1)實驗中加入緩沖液的作用是____________________________________。

(2)分析實驗結果可知:對酶活性有影響的離子是______________,其中對酶活性有抑制作用的離子是______________,對酶活性有促進作用的離子是__________

(3)該實驗中設置4號試管的目的是____________;設置3號試管的目的是____________

(4)上述實驗中若用斐林試劑代替碘溶液進行檢測,1~4號試管中的顏色依次是________、________________、________。根據上述實驗結果,在操作過程中,保溫之前不能加入斐林試劑,其原因是______________。

【答案】維持反應液中pH的穩(wěn)定 氯離子和銅離子 銅離子 氯離子 對照 確定鈉離子和硫酸根離子對唾液淀粉酶催化活性是否有影響 深磚紅色 無磚紅色(藍色) 淺磚紅色 淺磚紅色 斐林試劑中含有銅離子,可抑制唾液淀粉酶的活性

【解析】

分析實驗結果:加入1% NaCl溶液的1號試管中,淀粉被淀粉酶水解了,可能是Na+Cl-對酶的活性有促進作用,如果Na+能夠促進唾液淀粉酶的活性,則3號試管中最后的結果應該也是無色,而3號試管中實驗結果為淺藍色,可見其促進作用的不是Na+,而是Cl-;同理,通過2號和3號試管的比較可知,Cu2+能夠抑制唾液淀粉酶的活性.

1PH是無關變量,要進行控制,表格中顯示“pH6.8緩沖液”,就是保證各試管中PH相同且是唾液淀粉酶的適宜PH
2)比較實驗結果,1號無色說明該試管淀粉已經完全分解,2號深藍色說明該試管淀粉沒被分解,3、4號淺藍色說明該試管淀粉部分被分解;再比較各試管加的試劑,可知4號是對照,3號試管加的試劑對酶的活性沒影響,則Cl-有促進作用;Cu2+有抑制作用.
33號試管加入的Na2SO4,與1、2號有重復的,其作用是確定Na+SO42-對唾液淀粉酶催化活性是否有影響.
41號試管中的唾液淀粉酶的活性增強,淀粉被水解成葡萄糖,所以加入斐林試劑后由深磚紅色沉淀生成,2號試管中的唾液淀粉酶的活性受抑制,淀粉未被水解成葡萄糖,所以加入斐林試劑后無磚紅色,3號試管中的唾液淀粉酶的活性為受到影響,淀粉部分被水解成葡萄糖,所以加入斐林試劑后由淺磚紅色沉淀生成,4號試管中的唾液淀粉酶的活性也未受到影響,結果同3號試管;斐林試劑中含有Cu2+,對淀粉酶的活性又影響,故保溫之前不能加入斐林試劑.

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(2)若圖1中虛線方框內的堿基對被T-A堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛騞。從隱性純合子分離出圖1及其對應的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,產物中共有__________種不同DNA片段。為了提高實驗成功率,需要通過__________技術擴增目的基因,以獲得大量的目的基因。

(3)若將圖2中質粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行,形成重組質粒,那么應選用的限制酶是__________。在導入重組質粒后,為了篩選出含質粒的大腸桿菌,一般先用添加__________的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),然后將生長的菌接種到只含__________的培養(yǎng)基中培養(yǎng),可進一步篩選出含重組質粒的受體細胞。

(4)假設用BamHⅠ切割DNA獲取目的基因,用MboⅠ切割質粒,然后形成重組質粒,若將插入在抗生素B抗性基因處的目的基因重新切割下來,能否用BamHⅠ?__________。為什么?____________________。

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