【題目】下圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn),ampR為青霉素抗性基因,tetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動(dòng)子,T為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。
據(jù)圖回答:
(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后,其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有 、 、 三種。若 要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒,需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行 。
(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無(wú)任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 ;若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中,能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是 。
(3)目的基因表達(dá)時(shí),RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是 ,其合成的產(chǎn)物是 。
(4)在上述實(shí)驗(yàn)中,為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是 。
【答案】(1)目的基因—載體連接物 載體—載體連接物 目的基因—目的基因連接物 分離純化
(2)載體—載體連接物 目的基因—載體連接物、載體—載體連接物
(3)啟動(dòng)子 mRNA
(4)EcoRI和BamHI
【解析】(1)用EcoRI酶切出的目的基因和質(zhì)粒具有相同的黏性末端,如果放在一起加入DNA連接酶,則可出現(xiàn)三種連接結(jié)果,即會(huì)出現(xiàn)目的基因自身形成的連接物,載體自身形成的連接物和重組質(zhì)粒,要通過(guò)篩選、純化才能選出符合要求的DNA。(2)載體自身形成的連接物能重新形成完整的tetR基因,具有抗四環(huán)素的特點(diǎn),其他連接物中tetR基因被限制性內(nèi)切酶破壞,不再具有抗四環(huán)素的特點(diǎn);在整個(gè)操作過(guò)程中,ampR基因保持完整,質(zhì)粒自身形成的連接物和重組質(zhì)粒都具有抗青霉素的特性。(3)RNA聚合酶與相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合,完成的是轉(zhuǎn)錄過(guò)程。(4)將含有目的基因的靶DNA片段和載體分別用兩個(gè)不同的限制性內(nèi)切酶切割,使兩種DNA片段自身的5′和3′黏性末端不同,但二者相同末端又互補(bǔ),這明顯減少靶DNA片段和載體自身環(huán)化與串連,使外源DNA片段能正確插入載體啟動(dòng)子下游。在本題中目的基因兩端有EcoRI酶切點(diǎn)和BamHI酶切點(diǎn),在質(zhì)粒載體上也有這兩種酶的切點(diǎn),所以可以用這兩種酶切出非同源性互補(bǔ)末端來(lái)阻止其他連接。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】關(guān)于蛋白質(zhì)和核酸的敘述正確的是
A.氨基酸可含有S、P等元素,并且存在于羧基中
B.某種可水解肽鏈末端肽鍵的肽酶最終導(dǎo)致多肽鏈分解為若干短肽
C.DNA和RNA所含有的堿基種類完全不同
D.一個(gè)tRNA分子中只有一個(gè)反密碼子
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放到14N的培養(yǎng)液上培養(yǎng),讓其連續(xù)復(fù)制三次,再將全部復(fù)制產(chǎn)物置于試管內(nèi)進(jìn)行離心,如圖中分別代表復(fù)制1次、2次、3次后的分層結(jié)果的是( )
A. c、e、f
B. a、e、b
C. a、b、d
D. c、d、f
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】選取A、B植株的細(xì)胞進(jìn)行如下圖操作,請(qǐng)回答問(wèn)題:
(1)實(shí)現(xiàn)圖中的①過(guò)程最常用的方法是________。
(2)②過(guò)程的發(fā)生,必須進(jìn)行____________,其方法有____________法和____________法。
(3) 若細(xì)胞A內(nèi)含a個(gè)染色體,細(xì)胞B內(nèi)含b個(gè)染色體,則“雜種細(xì)胞”內(nèi)含________個(gè)染色體;若A、B植株采用常規(guī)雜交育種方法成功的話,得到的后代含_____個(gè)染色體,必須用______________來(lái)處理幼苗,才能得到可育的雜種植株,其中含有_____個(gè)染色體。這兩種方法相比,體細(xì)胞雜交方法的優(yōu)點(diǎn)是:__________________________________。
(4)如果原生質(zhì)體A為小鼠的漿細(xì)胞,原生質(zhì)體B為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞,誘導(dǎo)二者融合時(shí),獨(dú)特的方法是用_______處理。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】關(guān)于光合作用和呼吸作用的敘述,錯(cuò)誤的是( )
A.磷酸是光反應(yīng)中合成ATP所需的反應(yīng)物
B.光合作用中葉綠素吸收光能不需要酶的參與
C.人體在劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)所需要的能量由乳酸分解提供
D.病毒核酸的復(fù)制需要宿主細(xì)胞的呼吸作用提供能量
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】“綠葉中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)主要說(shuō)明了
A.色素分布在葉綠體類囊體的薄膜上
B.葉綠素的含量是類胡蘿卜素的4倍
C.葉綠體中色素的種類和各種色素的顏色
D.四種色素?cái)U(kuò)散速率不同
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】要從土壤中將分解纖維素的細(xì)菌分離出來(lái),應(yīng)該將它們接種在( )
A.加入指示劑的鑒別培養(yǎng)基上
B.含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上
C.只有纖維素粉而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上
D.含四大營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】一對(duì)黑色豚鼠生了2個(gè)小豚鼠(一個(gè)白色,一個(gè)黑色),若這對(duì)豚鼠再生2個(gè)小豚鼠,一個(gè)為黑色,一個(gè)為白色的概率是( )
A.
B.
C.
D.
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】已知玉米(2N)的高稈(易倒伏)對(duì)矮稈(抗倒伏)為顯性,抗病對(duì)易感病為顯性,控制上述兩對(duì)性狀的兩對(duì)基因分別位于兩對(duì)同源染色體上。為獲得純合矮稈抗病玉米植株,研究人員采用了下圖所示的方法。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是
A. 圖中①②過(guò)程均發(fā)生了同源染色體分離,非同源染色體自由組合
B. 圖中③過(guò)程產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植株是基因突變的結(jié)果
C. 圖中④過(guò)程“航天育種”方法中發(fā)生的變異類型是染色體畸變
D. 圖中單倍體加倍成純合矮桿抗病植株的方法常用秋水仙素處理幼苗或萌發(fā)的種子
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