Question

16．如圖為培育轉基因小鼠的部分過程示意圖．請回答下列問題．

（1）獲取目的基因是實施基因工程的第一步．
（2）圖中的A細胞通常為受精卵細胞，將外源基因導入該細胞常用的方法是顯微注射法．
（3）仔鼠出生后可用其尾巴進行DNA檢測，通過DNA分子雜交方法，檢測出攜帶外源基因的小鼠．至于外源基因是否合成相應的蛋白質(zhì)，可從轉基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應的（單克�。┛贵w與提取的蛋白質(zhì)者進行雜交，若能雜交，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因已表達．
（4）在外源基因導入小鼠的A細胞時，外源基因可能隨機地插入到該細胞的DNA中．這些細胞有的能發(fā)育成轉基因小鼠，有的卻死亡．請分析外源基因插入后導致有些A細胞死亡的最可能原因外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動必需的某些基因不能正常表達．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．
（2）培育轉基因動物常以受精卵作為受體細胞，因為受精卵的全能性最高；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）檢測外源基因是否導入受體細胞用DNA分子雜交技術；檢測是否成功表達蛋白質(zhì)采用抗原-抗體雜交技術，即從轉基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應的（單克�。┛贵w與提取的蛋白質(zhì)者進行雜交，若能雜交，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因已表達．
（4）外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動必需的某些基因不能正常表達，進而導致細胞死亡．
故答案為：
（1）獲取目的基因
（2）受精卵　顯微注射法
（3）DNA分子雜交�。▎慰寺。┛贵w　已表達
（4）外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動必需的某些基因不能正常表達

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題．