【題目】如圖1為某種常用質粒的序列圖,LacZ基因編碼的酶能使無色的X﹣gal變?yōu)樗{色,Ampr為氨芐青霉素抗性基因.圖2為目的基因的序列及其相關限制酶的識別序列.請回答下列問題:
(1)基因工程的核心步驟是
(2)實驗小組用BamHⅠ和BlgⅡ兩種限制酶切割目的基因和質粒,若要篩選成功導入目的基因的重組質粒,培養(yǎng)基中應加入的物質有
(3)成功導入重組質粒的大腸桿菌菌落顯 , 若大腸桿菌菌落顯藍色,說明導入 . 沒有導入任何外源DNA的大腸桿菌(填“能”或“不能)在該培養(yǎng)基上生存.
(4)將若干個質粒和目的基因用BamHⅠ和BlgⅡ兩種限制酶切割后,用DNA連接酶相連,然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功連接后的產物,獲得了長度為0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四種長度的DNA片段,則目的基因的長度為kb(已知目的基因的長度大于1kb,1kb=1000個堿基對).

【答案】
(1)構建基因表達載體
(2)X﹣gal;氨芐青霉素
(3)白色;沒有目的基因的空質粒;不能
(4)1.8
【解析】解:(1)基因工程的核心步驟是構建基因表達載體.(2)由于Lac Z基因編碼的酶能使無色的X﹣gal變?yōu)樗{色,Amp為氨芐青霉素抗性基因,所以若要篩選成功導入目的基因的重組質粒,培養(yǎng)基中應加入的物質有X﹣gal和氨芐青霉素.(3)構建重組質粒后導入大腸桿菌中,在篩選重組質粒的培養(yǎng)基上,由于Lac Z基因編碼的酶能使無色的X﹣gal變?yōu)樗{色,若大腸桿菌菌落顯藍色,說明導入的是不含目的基因的空白質粒.若大腸桿菌菌落顯白色,說明Lac Z基因被破壞,不能編碼相應的酶,導入的是重組質粒.沒有導入任何外源DNA的大腸桿菌不含氨芐青霉素抗性基因,所以不能在該培養(yǎng)基上生存.(4)用BamHⅠ切割和EcoRⅠ切割成功連接后的產物,獲得了長度為獲得了長度為0.7kb、2.8kb、1kb和2.5kb四種長度的DNA片段,這說明重組質粒的總長度為0.7kb+2.8kb=3.5kb.由于目的基因的長度大于12kb,若正向連接時,BamHⅠ切點與EcoRⅠ切點之間的距離為2.8kb,則質粒中EcoRⅠ切點到BamHⅠ切點之間距離為0.7kb(含有Ampr的一段).反向連接時,質粒中EcoRⅠ切點到BamHⅠ切點之間距離(含有Ampr的一段)+目的基因的長度=2.5kb.因此,目的基因的長度為2.5﹣0.7=1.8kb.

所以答案是:(1)構建基因表達載體 (2)X﹣gal 氨芐青霉素(3)白色 沒有目的基因的空質粒 不能(4)1.8

【考點精析】掌握基因工程的原理及技術是解答本題的根本,需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術.

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B瓶中澄清的石灰水還可用______________代替。

2乙組利用圖所示裝置橡皮塞上的彎管為帶有紅色液滴的刻度玻璃管,探究酵母菌的細胞呼吸類型。

若想達到實驗目的,還必須設置______實驗,實驗裝置設計為裝置編號為:____________代替10%NaOH溶液,其他條件與裝置相同。

預測實驗結果并得出相應實驗結論:

若裝置的液滴向左移動,裝置的液滴不移動,則酵母菌只進行__________。

若裝置的液滴______移動,裝置的液滴_____移動則酵母菌只進行__________;

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