Question

【題目】科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因牛，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。

（1） 由過程①獲得的A為________________________。過程②③④分別采用的是胚胎工程中的___________技術(shù)、______________技術(shù)、_______________技術(shù)。

（2）圖中去掉卵母細(xì)胞的核，目的是________________________。受體應(yīng)選用____________期卵母細(xì)胞。

（3） 體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時，所需氣體主要有O2和CO2，其中CO2的作用是____________。

（4）進(jìn)行胚胎移植時，代孕母牛對移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生__________________，這為重組胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。為了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技術(shù)。

（5）采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因牛，這是因?yàn)?/span>__________________________________。

Answer 1

【答案】含目的基因的表達(dá)載體 （體細(xì)胞）核移植 細(xì)胞培養(yǎng) （早期）胚胎移植 保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞 MⅡ 維持培養(yǎng)液（基）的pH（或：酸堿度） 免疫排斥反應(yīng) 胚胎分割 成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

【解析】

胚胎移植的生理基礎(chǔ)

（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；

（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；

（3）子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；

（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。

（1）要想目的基因只在乳腺組織中表達(dá)，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需要將人的血清白蛋白基因和乳腺組織特異性表達(dá)的啟動子等調(diào)控組建重組在一起，過程①獲得的A為含目的基因的表達(dá)載體，A常用顯微注射法導(dǎo)入受體細(xì)胞。過程②③④分別采用的技術(shù)手段為（體細(xì)胞）核移植、（動物）細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)。

（2）在核移植之前，必須先去掉受體卵細(xì)胞的核，目的是保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞，核移植的受體應(yīng)選用處于MⅡ中期的卵母細(xì)胞。

（3）體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時，所需氣體主要有O2和CO2，其中氧氣是細(xì)胞代謝所必需的，而CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。

（4）進(jìn)行胚胎移植時，代孕母牛對移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。通常可采用胚胎分割技術(shù)提高已有胚胎的利用率。

（5）因?yàn)檎�合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，所以采用胎兒成纖維進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊。