Question

【題目】“渥堆”是普洱茶生產過程中的一道特殊工序，是形成普洱茶品質特征最關鍵的一步。在“渥堆”過程中，曲霉、青霉、酵母菌、細菌等微生物的活動使茶葉所含茶多酚等成分發(fā)生了一系列復雜的物理、化學變化，促使了普洱茶甘滑、醇厚和陳香等良好品質特征的形成。請回答下列問題：

（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可用于“渥堆”茶樣中細菌的分離，其中的牛肉膏、蛋白胨可為細菌生長主要提供______________。配好的培養(yǎng)基常用______________法滅菌。接種培養(yǎng)后可根據(jù)______________顏色、形態(tài)、大小等特征及菌體革蘭染色情況細胞形態(tài)特征等進行初步鑒定。

（2）下圖為“渥堆”茶樣分離出的某種微生物亞顯微結構意圖，可根據(jù)圖中______________（填序號）結構判斷其肯定不是細菌。

（3）茶多酚中的兒茶素（C）有一定的抗菌作用，但作用較弱。研究人員用稀土離子Yb3+對兒茶素（C）進行化學修飾，形成配合物Yb3+一C，并探究其抗菌效果。將金黃色葡萄球菌制成菌懸液，分別加入等量的C、Yb3+和一定濃度的Yb3+-C，測定24h內金黃色葡萄球菌存活數(shù)量變化（用A600值表示，數(shù)值越大，表示細菌數(shù)量越多），結果如下圖。

由圖可以看出，______________能最有效縮短滅菌時間。

研究人員利用透射電鏡觀察了各組金黃色葡萄球菌細胞的超微結構，結果顯示：

（a）未加抗菌劑：細菌菌體較小，其細胞質分布均勻；

（b）C處理：細胞壁和細胞膜等結構不光滑，略顯粗糙；

（c）Yb3+處理：細胞質出現(xiàn)較明顯的固縮及空泡化現(xiàn)象；

（d）Yb3+-C處理：細胞壁及細胞膜等結構發(fā)生破裂，細胞質出現(xiàn)了嚴重的固縮及空泡化現(xiàn)象。

由此可見，兒茶素（C）作用的主要位點是______________，推測Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理是______________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 高壓蒸汽滅菌 菌落 ②③⑥⑦ Yb3+-C 細胞壁和細胞膜（或細胞膜/細胞表面） 兒茶素作用于細胞表面，使Yb3+更容易進入細胞內，破壞細胞結構，導致細胞死亡

【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基，其中的蛋白胨為微生物的生長提供了碳源、氮源、維生素（特殊營養(yǎng)物質）等營養(yǎng)物質．制備的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌方法進行滅菌。欲將所取的金沙江水樣品進行大腸桿菌的分離與計數(shù)，可用稀釋涂布平板法來完成。

培養(yǎng)基的營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。菌落，是指由單個或少數(shù)微生物細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態(tài)、構造等特征的子細胞集團。

（1）含有碳（氮）元素且能被微生物生長繁殖所利用的一類營養(yǎng)物質統(tǒng)稱為碳（氮）源，牛肉膏、蛋白胨營養(yǎng)豐富，可為細菌生長主要提供碳源、氮源。培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落，即是由一個單細胞繁殖而成，細菌體積小肉眼看不見，一般通過菌落來鑒定細菌。

（2）原核生物僅有的細胞器是核糖體，且原核生物沒有完整的細胞核，②為細胞核，③為內質網(wǎng)，⑥為線粒體，⑦為液泡，因此可根據(jù)圖中②③⑥⑦結構判斷其肯定不是細菌。

（3）從圖中可知，數(shù)值越小，表示細菌數(shù)量越少，因此Yb3+-C組能最有效縮短滅菌時間。a和b相比，自變量是是否經C處理，可見，兒茶素（C）作用的主要位點是細胞壁和細胞膜（或細胞膜/細胞表面）。a和c相比，自變量是是否經Yb3+處理，可見，兒茶素Yb3+作用的主要位點是細胞質。結合d組的結果可知，Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理可能是兒茶素作用于細胞表面，使Yb3+更容易進入細胞內，破壞細胞結構，導致細胞死亡。