Question

【題目】某研究性學(xué)習(xí)小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發(fā)酵中產(chǎn)生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該小組利用泡菜液進(jìn)行了相關(guān)的研究。請(qǐng)回答下列問題：

（1）測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用_________法。

（2）小組成員用改良的MRS固體培養(yǎng)基分離乳酸菌，該培養(yǎng)基成分如下：

蛋白胨	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖	CaCO3	瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”成“鑒別”）培養(yǎng)基。

②小組成員將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0．1ml加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基。在50℃左右操作的原因是_____________________，加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基的目的是______________________________。

③在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進(jìn)行進(jìn)一步純化。若下圖甲是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對(duì)應(yīng)的平板劃線操作示意圖為___________圖。

④乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長(zhǎng)期保存時(shí)，需要加入一定量的__________________。

Answer 1

【答案】比色 鑒別 此時(shí)培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手 隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境 丙 甘油

【解析】

1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、運(yùn)用平板劃線法接種微生物時(shí)，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)'要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。
3、菌種保存

	臨時(shí)保存法	甘油管藏法
適用對(duì)象	頻繁使用的菌種	長(zhǎng)期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長(zhǎng)成后于冰箱中保存，每3～6個(gè)月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內(nèi)保存
缺點(diǎn)	菌種易被污染或產(chǎn)生變異	\\

（1）測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用比色法。

（2）①該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。
②小組成員將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0.1ml加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層固體培養(yǎng)基，在50℃左右操作的原因是此時(shí)培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手，加蓋一層固體培養(yǎng)基的目的是隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境。
③使用平板劃線法時(shí)，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時(shí)要從上一次劃線的末端開始劃線，如圖丙所示。
④長(zhǎng)期保存菌種應(yīng)該用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長(zhǎng)期保存時(shí)，需要加入一定量的甘油。