Question

【題目】如圖所示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請回答以下問題：

（1）圖中①過程用到的工具酶的特點是______________________。

（2）圖中②過程用到的工具酶是___________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。

（3）圖中③過程，需使用___________溶液處理農(nóng)桿菌，處理的目的是使該細(xì)菌處于感受態(tài)。

（4）圖中④過程的原理是___________。

（5）檢驗基因工程是否成功。首先應(yīng)檢測___________，這是外源基因能否在真核細(xì)胞內(nèi)___________的關(guān)鍵；其次，利用___________法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用抗原一抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割 DNA分子DNA連接酶基因表達載體的構(gòu)建氯化鈣植物細(xì)胞的全能性轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入外源基因穩(wěn)定遺傳分子雜交

【解析】

圖示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖，圖中①是用限制酶切割雜交質(zhì)粒的T-DNA片段；②是用DNA連接酶將獲取的外源基因和切割的質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒，也即是基因表達載體的構(gòu)建過程，是基因工程的核心步驟；③是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌中；④是通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)將侵染有目的基因的外置體培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因煙草。

（1）根據(jù)前面的分析，圖中①過程用到的工具酶是限制酶，該酶的特點是能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子。

（2）圖中②過程用到的工具酶是DNA連接酶。基因工程最核心的步驟基因表達載體的構(gòu)建。

（3）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法,即用氯化鈣溶液處理該細(xì)菌,處理的目的是使該細(xì)菌處于感受態(tài)。所以圖中③過程，需使用氯化鈣溶液處理農(nóng)桿菌，處理的目的是使該細(xì)菌處于感受態(tài)。

（4）圖中④過程是植物組織培養(yǎng)過程，其原理是植物細(xì)胞具有全能性。

（5）檢測基因工程是否成功，首先檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因，這是目的基因能否在真核細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵；其次，利用分子雜交法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用抗原-抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。