Question

【題目】已知SARS是由一種RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下：

（1）實驗步驟①所代表的反應(yīng)過程是__________________________________。

（2）步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用限制鞋內(nèi)切酶和酶，后者的作用出是將限制性內(nèi)切酶切割的_________和___________連接起來。

（3）如果省略步驟③而將大量擴(kuò)增的S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S基因在大腸桿菌中不能_____________，也不能_________________________。

（4）為了檢驗步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用_________與___________進(jìn)行抗原一抗體特異性反應(yīng)實驗，從而得出結(jié)論。

（5）步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基序列_____________（相同、不同），根本原因是____________________________________。

Answer 1

【答案】（1）感受態(tài) （2）DNA連接 載體 S基因 （3）復(fù)制 合成S基因的mRNA（或轉(zhuǎn)錄）

（4）大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白 SARS康復(fù)病人血清（5）相同 表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同

【解析】試題分析：（1）目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞需要用Ca2+處理，使之處于易于接受外源DNA的感受態(tài)。

（2）根據(jù)目的基因表達(dá)載體要用限制酶切割質(zhì)粒，使之具有與目的基因相同的粘性末端，再用DNA連接酶將質(zhì)粒粘性末端和目的基因連接為重組質(zhì)粒。

（3）如果直接將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，會被分解，不能保存、復(fù)制和表達(dá)。

（4）將S蛋白與抗S蛋白的特異性抗體進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實驗，如果形成雜交帶，說明S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性。

（5）由于都是S基因，表達(dá)的S蛋白質(zhì)相同。