Question

【題目】人凝血因子Ⅷ對缺乏人凝血因子Ⅷ所致的凝血機能障礙具有糾正作用，主要用于防治甲型血友病、獲得性凝血因子Ⅷ缺乏而導(dǎo)致的出血癥狀及這類病人的手術(shù)出血治療。下圖是利用山羊乳汁生產(chǎn)人凝血因子Ⅷ的圖解，請據(jù)圖回答下列問題。

（1）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因_____（填“有”或“無”）內(nèi)含子。①過程利用了_____________原理。

（2）在②過程中，人凝血因子Ⅷ基因應(yīng)插入質(zhì)粒的______________之間�；�因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用是___________________。

（3）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到_______時期才可以進(jìn)行去核處理。③過程通過______方法使兩細(xì)胞融合，構(gòu)建重組胚胎。

（4）在重組胚胎的培養(yǎng)液中加入________________________等天然成分以提供營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)液需要定期更換的原因是_______________________________。

Answer 1

【答案】無 DNA（雙鏈）復(fù)制 啟動子和終止子 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因并將含目的基因的 受體細(xì)胞篩選出來 減數(shù)第二次分裂中期（MII） 電刺激（或振蕩） 血清、血漿 清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害

【解析】

圖示分析，①表示PCR，增加目的基因的數(shù)量，②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，③受體細(xì)胞與去核的卵母細(xì)胞融合形成重組胚胎。

（1）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因無內(nèi)含子。①PCR擴增目的基因，利用了DNA（雙鏈）復(fù)制原理。

（2）②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，在此過程中，人凝血因子Ⅷ基因應(yīng)插入質(zhì)粒的啟動子和終止子之間。基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因并將含目的基因的 受體細(xì)胞篩選出來。

（3）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MII時期才可以進(jìn)行去核處理。③受體細(xì)胞與去核的卵母細(xì)胞融合形成重組胚胎，此過程通過電刺激（或振蕩）方法使兩細(xì)胞融合。

（4）在重組胚胎的培養(yǎng)液中加入血清、血漿等天然成分以提供營養(yǎng)物質(zhì)。為了清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害，培養(yǎng)液需要定期更換。