（1）微生物的反硝化作用，是氮循環(huán)中一個(gè)重要的生物過程。亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關(guān)鍵酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）轉(zhuǎn)錄后，再翻譯出具有___________作用的蛋白質(zhì)。

（2）工程菌的構(gòu)建

①研究者利用NCBI數(shù)據(jù)庫查到nirS基因的堿基序列，設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增nirS基因。PCR技術(shù)利用了___________的原理，使用耐高溫Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。

②研究者用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理nirS基因與p質(zhì)粒，在_______________酶的作用下進(jìn)行體外連接，用連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5，在含慶大霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)并提取質(zhì)粒，如果用HindⅢ和BamHI雙酶切，得到兩個(gè)片斷電泳結(jié)果分別與_______________電泳結(jié)果基本一致，說明獲得重組質(zhì)粒pYP4S。

③將pYP4S轉(zhuǎn)化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培養(yǎng)后進(jìn)行PCR鑒定。為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖1所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的最佳一對引物組合是_________。某學(xué)生錯(cuò)選了圖中的另外一對引物組合，擴(kuò)增出長度為2．1kb的片段，原因是_______________。

（3）檢測工程菌YP4S除氮的效能

①工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中培養(yǎng)36h后，檢測結(jié)果如圖2。結(jié)果表明___________________。

②要進(jìn)一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應(yīng)___________________________。

（1）調(diào)查嚙齒動物的密度應(yīng)該采用__________法。據(jù)圖可知，三種放牧方式中嚙齒動物總捕獲率最高的是___________，其原因是____________________。

（2）下表為不同放牧方式下嚙齒動物群落多樣性特征。

豐富度指數(shù)計(jì)算公式：，S為物種數(shù)，N為群落中所有物種個(gè)體數(shù)

禁牧區(qū)嚙齒動物的數(shù)量最低，且___________也最低，推測禁牧可能會降低種間___________的激烈程度，使鼠害發(fā)生的可能性___________。

（3）綜上所述，本研究結(jié)果表明，三種放牧方式中____________更利于合理利用草地資源并且能夠抑制鼠害發(fā)生。

（1）機(jī)體免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位是___________，TF屬于免疫系統(tǒng)組成中的___________。

（2）科研人員制備了SpaA疫苗和經(jīng)SpaA疫苗免疫的小鼠特異性TF，并對小鼠TF進(jìn)行無菌檢測和安全性檢測。

①請簡要寫出對小鼠TF進(jìn)行無菌檢測的實(shí)驗(yàn)思路：______________________________________。

②小鼠TF的安全性檢測

取100μL小鼠特異性TF和普通TF分別腹腔接種2組小鼠，對照組的處理是___________________。接種后48h內(nèi)觀察并記錄小鼠的各項(xiàng)生理活動，48h后剖殺小鼠，檢查其腹腔及各臟器有無異常病理變化。

（3）選取20只體質(zhì)量為20～22g的小鼠，將其隨機(jī)均分成4組，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)：

注：吸光值（OD）越大表明抗體的含量越多

表中A、B的處理分別是：A___________，B__________。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明：____________________。

（1）研究SEDL遺傳方式的調(diào)查方法是___________。根據(jù)圖1可以初步判斷此病最可能的遺傳方式是___________。請說明判斷理由：____________________________________________。

（2）已知SEDL基因編碼Sedlin蛋白，該基因中有6個(gè)可表達(dá)的片段（外顯子）�？蒲腥藛T對上述家庭成員Ⅲ-5的SEDL基因的外顯子進(jìn)行測序，部分結(jié)果如圖2所示。

由圖2可知，患者SEDL基因的外顯子堿基序列異常是由于堿基對_______________而發(fā)生突變，最終導(dǎo)致Sedlin蛋白的_______________發(fā)生改變，影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)至高爾基體間的囊泡運(yùn)輸。

（3）科研人員體外培養(yǎng)人軟骨細(xì)胞，探討SEDL基因?qū)θ塑浌羌?xì)胞生理活性的影響。

①實(shí)驗(yàn)分組

A組：______________________________（請寫出處理方案）

B組：將不能干擾SEDL基因表達(dá)的病毒轉(zhuǎn)染人軟骨細(xì)胞

C組：將能干擾SEDL基因表達(dá)的病毒轉(zhuǎn)染人軟骨細(xì)胞

②培養(yǎng)一段時(shí)間后，收集人軟骨細(xì)胞，檢測結(jié)果如圖3所示。

圖3電鏡觀察各組人軟骨細(xì)胞，箭頭指示為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果為___________________。推測Sedlin蛋白缺乏導(dǎo)致___________，引起軟骨發(fā)育不良。

注：圖中暗斑深度表示營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)移量多少

A.甲組是對照組，乙組和丙組是實(shí)驗(yàn)組

B.甲組和丙組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明細(xì)胞分裂需要營養(yǎng)

C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示細(xì)胞分裂素含量高的地方營養(yǎng)物質(zhì)的分布多

D.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明細(xì)胞分裂素吸引營養(yǎng)物質(zhì)向其所在濃度高的部位運(yùn)輸

A.自噬體與溶酶體融合依賴膜的流動性

B.LC3-II/LC3-I的比值隨運(yùn)動強(qiáng)度增大而增大

C.運(yùn)動可以抑制大鼠細(xì)胞的線粒體自噬

D.溶酶體內(nèi)的水解酶能分解衰老、損傷的線粒體

I．請根據(jù)圖1回答下列問題：

（1）在圖中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是________。融合后的細(xì)胞經(jīng)過多次篩選才能獲得理想的細(xì)胞，此類細(xì)胞的特點(diǎn)是________。

（2）制備單克隆抗體過程中要用到________和________技術(shù)。

II．請根據(jù)圖2回答下列問題：

（3）圖2中①②過程使用了________酶，以使植物原生質(zhì)體相互分離，此處使用的溶液濃度較大，以保證植物細(xì)胞會發(fā)生________，以保護(hù)原生質(zhì)體不被破壞。

（4）過程________屬于脫分化，過程________屬于再分化，細(xì)胞發(fā)生分化的根本原因是________。

（5）過程⑤⑥⑦的細(xì)胞工程技術(shù)是________，其培養(yǎng)時(shí)選用的材料通常是分生組織，原因是________。

（6）植物體細(xì)胞雜交的研究在________方面，取得了巨大突破。

（1）如果遺傳性胰腺炎致病基因用A表示，某重癥聯(lián)合免疫缺陷病致病基因用b表示，Ⅲ-1基因型為__________，這兩對基因的遺傳遵循_______________規(guī)律。

（2）若Ⅲ-3的胎兒是男孩，則該男孩患某重癥聯(lián)合免疫缺陷病的幾率為________。

（3）產(chǎn)前檢查時(shí)，對從羊水分離出胎兒脫落的細(xì)胞進(jìn)行系列分析，確定胎兒的基因型為aaXbXbY。造成該胎兒性染色體異常的原因很可能是因?yàn)?/span>______（父親/母親），分析異常生殖細(xì)胞形成的可能原因______________________。

（4）遺傳性胰腺炎的遺傳方式應(yīng)采用的方法是________，研究發(fā)病率應(yīng)采用的方法是______。

A．在人群中隨機(jī)抽樣調(diào)查并計(jì)算發(fā)病率

B．在人群中隨機(jī)抽樣調(diào)查研究遺傳方式

C．在患者家系中調(diào)查并計(jì)算發(fā)病率

D．在患者家系中調(diào)查研究遺傳方式

（1）從細(xì)胞分裂方式看，圖甲可以表示__________分裂，細(xì)胞分裂過程中核糖體功能最活躍的時(shí)期是__________對應(yīng)的時(shí)期（填字母代號）。

（2）圖甲中d、e階段細(xì)胞質(zhì)中mRNA明顯減少，最可能的原因是__________．

（3）圖乙中的Ⅱ?qū)��?yīng)圖甲中的__________段。

（4）圖乙中Ⅰ有__________對同源染色體，__________個(gè)染色體組。

（5）下圖是某個(gè)體減數(shù)分裂形成配子時(shí)兩對染色體及其相關(guān)基因的分布情況，據(jù)圖回答：

①假設(shè)減數(shù)分裂完成后，形成了DdA的精細(xì)胞，其原因可能是___________________________________________________。

②假設(shè)減數(shù)分裂完成后，形成了Da的精細(xì)胞，則同時(shí)產(chǎn)生的其他三個(gè)精細(xì)胞的基因型是________________________。（不考慮交叉互換）

（1）圖甲中，細(xì)胞器a為______，該植物細(xì)胞發(fā)生滲透吸水的外在條件是________________________。

（2）圖甲顯示，在細(xì)胞器b中進(jìn)行的能量變化為____________________。

（3）圖中⑤代表的物質(zhì)其分子結(jié)構(gòu)簡式是__________________。

（4）將一株植物放置于密閉的容器中，用紅外測量儀進(jìn)行測量，測量時(shí)間均為1小時(shí)，測定的條件和結(jié)果如圖乙所示（數(shù)據(jù)均在標(biāo)準(zhǔn)狀況下測得），據(jù)此回答：

①在15℃、1klx光照條件下，該植物10小時(shí)光合作用固定CO2________________mL。

②在無光條件下25℃比15℃釋放CO2多，說明溫度是通過影響_____________來影響代謝的。

（5）從圖中發(fā)現(xiàn)，影響A點(diǎn)和B點(diǎn)光合速率的因素主要是__________________________。