Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）科研人員從山西老陳醋的醋醅中分離出產(chǎn)酸能力強的醋桿菌，回答下列相關(guān)問題：

（1）已知溴甲酚紫 pH 變色范圍是5.2（黃色）～6.8（紫色）。在分離醋桿菌用的培養(yǎng)基中加入溴甲酚紫作為_______以鑒別產(chǎn)醋桿菌。配制培養(yǎng)基時，加入經(jīng) _________滅菌的乙醇，乙醇的主要作用是___________。

（2）三角瓶、試管、培養(yǎng)皿等用牛皮紙或報紙包扎好后置于高壓蒸汽滅菌鍋中滅菌，要注意滅菌物品不能放太滿太擠，要留出空隙以利于______。滅菌后，通常將實驗用具放入60℃～80℃的烘箱中烘干，目的是_________。

（3）取 10g 山西老陳醋的醋醅等梯度稀釋，用 ___________取 10 -3、10-4、10 -5稀釋度的樣品稀釋液0．1mL 涂布于平板分離培養(yǎng)基上，30℃倒置培養(yǎng)48h。若要篩選產(chǎn)酸能力強的菌種，需挑選若干個 ___________比值大的菌落，分別用________擴增，然后離心檢測培養(yǎng)液中醋酸含量。

（二）胚胎干細胞（ES細胞）介導(dǎo)法的主要操作過程是：將外源基因?qū)�入胚胎干細胞，然后將轉(zhuǎn)基因的胚胎干細胞注射于受體動物胚胎后可參與宿主的胚胎構(gòu)成。如圖是利用胚胎干細胞介導(dǎo)法培育出熒光小鼠的過程�；卮鹣铝袉栴}：

（1）從水母中獲取綠色熒光蛋白基因 有多種方法。將水母的全部基因用 _______切成片段，插入到載體分子中，并將所得的 _______轉(zhuǎn)入大腸桿菌，通過_________使目的基因擴增，再用某種探針釣取目的基因。

（2）③過程常用________方法，④過程中飼養(yǎng)層的作用是_______，⑤過程注入的胚胎干細胞具有______ 特點，從而可分化成個體的各種組織和器官。在進行⑥之前，需對受體母鼠進行_______處理。

（3）關(guān)于受體母鼠妊娠產(chǎn)下的子代小鼠的特點，下列敘述正確的是_____________。

A．各細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以全身每個細胞都有綠色熒光蛋白產(chǎn)生

B．各細胞都有綠色熒光蛋白基因，但只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生

C．不是所有細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生

D．該小鼠產(chǎn)生的配子中含綠色熒光蛋白基因的概率為1/2

Answer 1

【答案】（酸堿）指示劑 過濾滅菌/G6 玻璃砂漏斗 作為碳源 蒸汽流通 除去滅菌時的水分 取樣器 黃色環(huán)帶直徑與菌落直徑 液體培養(yǎng)基 限制性核酸內(nèi)切酶 重組載體/重組 DNA/重組質(zhì)粒 大腸桿菌的繁殖 顯微注射的 促進胚胎干細胞的分裂，抑制胚胎干細胞的分化 發(fā)育全能性 同期發(fā)情 C

【解析】

據(jù)圖分析，目的基因是綠色熒光蛋白基因，①表示獲取目的基因，②表示構(gòu)建基因表達載體（重組質(zhì)粒），③表示將目的基因?qū)�入受體細胞（胚胎干細胞），④表示動物細胞（胚胎干細胞）培養(yǎng)，⑤表示將胚胎干細胞注入囊胚，⑥表示胚胎移植。

（一）（1）根據(jù)題意分析，溴甲酚紫在不同的pH條件下會變色，因此在分離醋桿菌用的培養(yǎng)基中加入溴甲酚紫作為（酸堿）指示劑以鑒別產(chǎn)醋桿菌；加入的乙醇可以為醋酸菌提供碳源，乙醇加入前需要經(jīng)過過濾滅菌。

（2）高壓蒸汽滅菌時，滅菌鍋中的滅菌物品不能放太滿太擠，要留出空隙以利于蒸汽流通；滅菌后，通常將實驗用具放入60℃～80℃的烘箱中烘干，以除去滅菌時的水分。

（3）應(yīng)該用取樣器取稀釋度的樣品稀釋液；溴甲酚紫在酸性條件下變黃，所以若要篩選產(chǎn)酸能力強的菌種，需挑選若干個黃色環(huán)帶直徑與菌落直徑比值大的菌落，分別用液體培養(yǎng)基擴增，然后離心檢測培養(yǎng)液中醋酸含量。

（二）（1）將水母的全部基因切成片段需要用限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶），然后插入到載體分子中形成重組載體（重組質(zhì)粒），再轉(zhuǎn)入大腸桿菌，通過大腸桿菌的繁殖使目的基因擴增。

（2）③表示將目的基因?qū)�入受體細胞（胚胎干細胞），常用顯微注射法；④表示胚胎干細胞的培養(yǎng)過程，該過程中飼養(yǎng)層的作用是促進胚胎干細胞的分裂，抑制胚胎干細胞的分化；⑤過程注入的胚胎干細胞具有發(fā)育全能性，從而可分化成個體的各種組織和器官；⑥表示胚胎移植，在胚胎移植之前，需對受體母鼠進行同期發(fā)情處理。

（3）據(jù)圖分析可知，將含有綠色熒光蛋白基因的胚胎干細胞注入囊胚，而囊胚中的原有細胞是不含綠色熒光蛋白基因的，因此胚胎移植后產(chǎn)生的小鼠并不是所有細胞都有綠色熒光蛋白基因，所以只有部分細胞有綠色熒光蛋白產(chǎn)生。

故選C。