Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）鎘是工業(yè)廢水中常見的污染物，對(duì)人休的傷害極大，我國(guó)環(huán)保法列為一類污染物。一些微牛物可以分泌多聚糖，糖蛋白，脂多糖，可溶性氨基酸等胞外聚介物質(zhì)，這些聚合物具有絡(luò)合或沉淀金屬離子，從而起到凈化工業(yè)廢水中重金屬鹽的功能。某同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選鎘降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）_________是消除污染雜菌的通用方法，也是用于篩選高表達(dá)量菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。

（2）鎘降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、鎘、葡萄糖、水等物質(zhì)，則其在進(jìn)行滅菌時(shí)應(yīng)控制壓力在______。分離時(shí)應(yīng)取不同濃度的稀釋液_________ml涂也到平板上。

（3）下圖為平板劃線法分離純化細(xì)菌，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程需要將接種環(huán)灼燒滅菌_____________次。

A.2 B.3 C.4 D.5

（4）采用光電比色測(cè)定法檢測(cè)降解后的廢水中鎘留量。在制備標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)驗(yàn)過(guò)程，下表中15號(hào)比色管的鎘濃度應(yīng)分別為_________。

管號(hào)	1	2	3	4	5	6
鎘濃度（mg/mL)						1

最后分別以_________為橫、縱坐標(biāo)繪制曲線。

（二）生物技術(shù)己經(jīng)滲入到了我們生活的方方面面。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)問(wèn)題：

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是_________，需要將培養(yǎng)瓶放入_________培養(yǎng)。

（2）培養(yǎng)過(guò)程中需要用胰蛋白酶消化組織中的_________。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細(xì)朐系往往具有_________核型。關(guān)于細(xì)胞系和細(xì)胞株下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（___）

A.原代培養(yǎng)得到的細(xì)胞也可以是細(xì)胞系

B.細(xì)胞株是特殊的細(xì)胞系

C.連續(xù)細(xì)胞系都獲得了不死性

D.連續(xù)細(xì)胞系不一定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化

（4）細(xì)胞克隆又稱為克隆培養(yǎng)法，它的最主要用途之一就是從普通細(xì)胞系中分離出_________突變會(huì)田胞系。

Answer 1

【答案】 單菌落的分離 500g/cm2 0.1 C 0、0.2、0.4、0.6、0.8 鎘濃度、光密度值 細(xì)胞增值 C02培養(yǎng)箱 膠原纖維 異倍體 D 缺乏特殊基因

【解析】試題分析：微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（一）（1）單菌落的分離是消除污染雜菌的通用方法。

（2）鎘降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、鎘、葡萄糖、水等物質(zhì)，則其在進(jìn)行滅菌時(shí)應(yīng)控制壓力在500g/cm2。分離時(shí)應(yīng)取不同濃度的稀釋液0.1ml涂到平板上。

（3）根據(jù)圖中平板劃線法中劃線的方向和起始端可知，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中劃了三次線，而每一次劃線前后都需要滅菌，所以一共需要滅菌4次，故選C。

（4）以鎘濃度為自變量，光密度值為因變量繪制曲線圖，其中表格中各組的鎘濃度應(yīng)該等濃度梯度，為0、0.2、0.4、0.6、0.8。

（二）（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增值，需要將培養(yǎng)瓶放入C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要用胰蛋白酶處理，消化組織中的膠原纖維，使得組織細(xì)胞分散開來(lái)。

（3）傳代培養(yǎng)得到的細(xì)朐系往往具有異倍體核型。原代培養(yǎng)得到的細(xì)胞也可以是細(xì)胞系，A正確；細(xì)胞株是特殊的細(xì)胞系，B正確；連續(xù)細(xì)胞系都獲得了不死性，C正確；連續(xù)細(xì)胞系肯定都發(fā)生了轉(zhuǎn)化，D錯(cuò)誤。

（4）細(xì)胞克隆又稱為克隆培養(yǎng)法，它的最主要用途之一就是從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因突變會(huì)田胞系。