Question

（14分）人的血清白蛋白在臨床上需求量很大，通常從人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重。如果應用一定的生物工程技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細胞中，利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。
大致步驟如下：
a．將人體血清白蛋白基因?qū)�入雌性奶牛胚胎細胞，形成重組細胞①；
b．取出重組細胞①的細胞核，注入去核牛卵細胞中，形成重組細胞②；
c．電脈沖刺激重組細胞②促使其形成早期胚胎；
d．將胚胎移植到母牛的子宮內(nèi)，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。
請回答下列問題：
（1）步驟a中，獲取的目的基因，在體外可通過      大量擴增，在導入雌性奶牛胚胎細胞前，需構(gòu)建重組DNA，該過程需要的工具酶是                         。
（2）步驟b利用的技術(shù)是             ，胚胎工程操作中最后環(huán)節(jié)是           。
（3）運用細胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞（ES細胞），培養(yǎng)如下：早期胚胎→內(nèi)細胞團→胚胎干細胞。在培養(yǎng)過程中，必須用          處理內(nèi)細胞團，使之分散成單個細胞，用于飼養(yǎng)層的細胞一般是         ，為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的             。

Answer 1

（1）PCR        限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA連接酶
（2）核移植     胚胎移植
（3）胰蛋白酶    胚胎成纖維細胞     抗生素 

解析試題分析：由題意可知，本題為一到涉及基因工程a、細胞核移植b、胚胎移植cd等眾多現(xiàn)代生物技術(shù)的題型。但最終是為了成功地得到能產(chǎn)生人的血清蛋白的轉(zhuǎn)基因牛。
（1）基因工程中，為了獲得大量的目的基因，可通過PCR技術(shù)對目的基因進行擴增；構(gòu)建基因表達載體常用兩種工具酶，一是基因的剪刀——限制性核酸內(nèi)切酶，二是基因的針線——DNA連接酶。
（2）根據(jù)b步驟的核心操作，將細胞核移植到去核牛卵細胞中，可知該技術(shù)屬于細胞核移植；胚胎工程最后要把胚胎移植到母體子宮中獲得完整的個體。
（3）細胞培養(yǎng)的過程中容易出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，所以要用胰蛋白酶把內(nèi)細胞團分離開，以來防止接觸抑制，二來增大細胞與培養(yǎng)液的接觸面積；胚胎成纖維細胞一般用作為飼養(yǎng)層細胞；在動物細胞培養(yǎng)的過程中，可加入適量的抗生素來移植其他細菌對培養(yǎng)液的污染。
考點：本題考查基因工程、細胞核移植和胚胎移植技術(shù)。
點評：本題有很強的綜合性，題干中短短的一句話就描述了一項生物技術(shù)，考生要能夠抓得住抓得準描述的重點， 一下確定題干所要表達的意思。