Question

【題目】為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對(duì)抗生素耐藥性情況”某同學(xué)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：

請(qǐng)分析回答下列問題：

（1）配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的_______和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要進(jìn)行的操作是_______。

（2）接種微生物的方法有很多，圖中過程①②③所示的方法為_______________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，原因是_________________。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的數(shù)量（單位：個(gè)/ml），這里的n=_____________（4或5或6）。經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為150、158和157。據(jù)此可得出每毫升樣品中的活菌數(shù)_______（填“至多”或“至少”）為________個(gè)。

（3）請(qǐng)完善“檢測(cè)乳酸菌對(duì)青霉素、四環(huán)素耐藥性”的實(shí)驗(yàn)操作步驟：

步驟1：分別取______________________________加入三組無菌培養(yǎng)皿中，再加入滅菌并冷卻到50°C左右的培養(yǎng)基，立即混勻，靜置凝固成平板。

步驟2：向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測(cè)的乳酸菌菌種。

步驟3：將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè)________都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況。

Answer 1

【答案】維生素 調(diào)pH 稀釋涂布平板法 分別計(jì)數(shù)3次取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠 6 至少 1.55×108 等量的且適量的青霉素、四環(huán)素、無菌水 未接種的培養(yǎng)基

【解析】

分析圖解可知，圖示過程為微生物分離與純化過程中的稀釋涂布平板法，即將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）配制的細(xì)菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)成分外，還應(yīng)加入適量的維生素和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間，要先調(diào)pH。

（2）接種微生物的方法有很多，圖1中過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法，用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)培養(yǎng)皿，分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。分析圖解可知，圖中酸奶樣品總共稀釋105倍，并且稀釋涂布平板時(shí)只取了0.1ml，因此這里的n=6。3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為：150、158和157，據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為（150+158+157）÷3÷0.1×105=1.55×108個(gè)。

（3）步驟1：根據(jù)等量原則，應(yīng)該分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中。步驟3：根據(jù)對(duì)照原則，應(yīng)該將接種后的三組培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天作為對(duì)照試驗(yàn)。