Question

【題目】下圖1為生產(chǎn)HIV單克隆抗體的過程，圖2為運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)HIV疫苗的操作簡(jiǎn)要路徑。 據(jù)圖分析回答。

（1）圖1中, 過程①稱為_____________技術(shù)，通過過程②獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行 ___________________ ，以便獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。

（2）圖2中, 過程①需要用到________酶。一個(gè)DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增最簡(jiǎn)便的方法是使用PCR技術(shù)，如果這個(gè)過程中消耗了引物62個(gè)，則共進(jìn)行了______輪的DNA復(fù)制。

（3）圖2所示的運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的HIV疫苗還不能有效用于艾滋病預(yù)防，原因是________________________________________。

（4）用限制酶處理DNA片段，可使特定核苷酸序列特定部位的_____________鍵斷開。若用X、Y兩種限制酶作用于圖2中的DNA片段，并進(jìn)行電泳分析，其結(jié)果如下圖。A至D選項(xiàng)中,關(guān)于兩種酶切位置的判斷, 正確的是____。

Answer 1

【答案】 （動(dòng)物)細(xì)胞融合 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) 逆轉(zhuǎn)錄 5 艾滋病病毒為單鏈RNA病毒，變異頻率高 磷酸二酯 B

【解析】根據(jù)圖1中生產(chǎn)HIV單克隆抗體的過程分析，HIV自愈者的免疫細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)過程①的誘導(dǎo)融合得到雜交細(xì)胞，再經(jīng)過程②的篩選（克隆培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)），得到既能產(chǎn)生特異性抗體又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞，收集所需的單克隆抗體。圖2為運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)HIV疫苗的操作簡(jiǎn)要路徑，首先提取HIV的RNA片段，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程（①），得到DNA片段，再將含疫苗基因的DNA片段插入（②）到質(zhì)粒中，構(gòu)建出基因表達(dá)載體；然后將含疫苗基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入（③）到酵母菌細(xì)胞內(nèi)，通過檢測(cè)和鑒定能產(chǎn)生疫苗的酵母菌，提取HIV疫苗。

（1）根據(jù)前面的分析可知，圖1中過程①稱為動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和過程②融合實(shí)驗(yàn)完成后，經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，以便獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（2）根據(jù)前面的分析可知，圖2中過程①是逆轉(zhuǎn)錄過程，需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶。一個(gè)DNA片段進(jìn)行PCR技術(shù)擴(kuò)增，如果這個(gè)過程中共消耗了引物62個(gè)，則第一次消耗2個(gè)引物；第二次則消耗4個(gè)引物，第三次消耗8個(gè)引物，以此類推，第四次消耗16個(gè)，第五次消耗32個(gè)，累計(jì)剛好總消耗2+4+8+16+32=62個(gè)引物。

（3）通過圖2所示的基因工程技術(shù)生產(chǎn)的HIV疫苗常常還不能有效用于艾滋病預(yù)防，主要原因在于艾滋病病毒是單鏈RNA病毒，變異頻率高。

（4）限制酶作用的化學(xué)鍵是切斷特定核苷酸之間的磷酸二酯鍵。根據(jù)電泳結(jié)果圖分析可知，若只用X一種限制酶作用于圖2中的DNA片段，產(chǎn)生3條不同的DNA短片段（6000、3500和500），說明限制酶X對(duì)該DNA有兩個(gè)切點(diǎn)；若只用Y一種限制酶作用于圖2中的DNA片段，產(chǎn)生2條不同的DNA短片段（8000、2000），說明限制酶Y對(duì)該DNA只有1個(gè)切點(diǎn)；而同時(shí)用兩種限制酶切割該DNA 片段，得到4條不同DNA短片段（4500、3500、1500和500），說明兩種限制酶對(duì)該DNA的3個(gè)切點(diǎn)是不重合的；分析得到的所有不同DNA短片段并與選項(xiàng)結(jié)合分析可知，只有B選項(xiàng)符合題意。