Question

【題目】基因工程是從分子水平對基因進(jìn)行操作，從而實現(xiàn)人們定向改造生物，得到人們所需要的生物性狀或生物產(chǎn)品的技術(shù)。目的基因的獲取是基因工程的第一步，常見的方法是構(gòu)建基因組文庫。請分析并回答下列問題：

（1）構(gòu)建基因組文庫的一般步驟：

①提取某種生物體內(nèi)的__________，用適當(dāng)?shù)南拗泼柑幚�，得到一定范圍大小的DNA片段；

②DNA片段分別與載體結(jié)合，得到重組載體；

③重組載體導(dǎo)入到__________的群體中儲存，基因組文庫構(gòu)建完成。

（2）與基因組文庫相比，cDNA文庫的基因數(shù)相對要少。其原因是__________。

（3）載體與DNA片段結(jié)合前，需要使用同種的限制酶處理。其目的是__________。

（4）受體菌被導(dǎo)入重組DNA分子之前，常用__________處理，提高導(dǎo)入的成功率。

Answer 1

【答案】 全部DNA或全部基因 受體菌 cDNA文庫只能收集到生物發(fā)育到某時期己發(fā)生轉(zhuǎn)錄的基因，而基因組文庫能收集到全部基因 以獲得與DNA片段相同的粘性末端 Ca2+

【解析】試題分析：基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫，其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，如：cDNA文庫。基因組文庫與cDNA文庫比較：

（1）構(gòu)建基因組文庫的一般步驟為：

①提取某種生物體內(nèi)的全部DNA或全部基因，用適當(dāng)?shù)南拗泼柑幚�，得到一定范圍大小的DNA片段；

②DNA片段分別與載體結(jié)合，得到重組載體；

③重組載體導(dǎo)入到受體菌的群體中儲存，基因組文庫構(gòu)建完成。

（2）cDNA文庫只能收集到生物發(fā)育到某時期己發(fā)生轉(zhuǎn)錄的基因，而基因組文庫能收集到全部基因，因此與基因組文庫相比，cDNA文庫的基因數(shù)相對要少。

（3）載體與DNA片段結(jié)合前，需要使用同種的限制酶處理，以獲得與DNA片段相同的粘性末端。

（4）將重組DNA導(dǎo)入受體菌群之前，常用鈣離子處理，以提高導(dǎo)入的成功率。