Question

【題目】雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。下圖是科研人員通過雜交一雜交瘤細胞技術(shù)（免疫的B細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過程。分析回答：

（1）過程①的目的是___________，制備雙特異性單克隆抗體的過程中用到的技術(shù)有___________（至少答出兩條）。

（2）過程②誘導融合的方法是___________，過程②選用的骨髓瘤細胞___________（填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。

（3）經(jīng)過程③篩選得到的細胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進行過程④，原因是_____________________。

（4）請根據(jù)所學知識，用箭頭和文字在圖中方框內(nèi)補全獲取單克隆雜交一雜交瘤細胞的生產(chǎn)過程。

（5）獲得的單克隆雜交一雜交瘤細胞在體外條件下培養(yǎng)或___________，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。

Answer 1

【答案】 使小鼠產(chǎn)生能分泌識別癌胚抗原抗體的漿細胞（B淋巴細胞）動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng) 聚乙二醇（PEG）誘導、電激等 不能 從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞不止一種類型（篩選得到的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體） 將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合→在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交→雜交瘤細胞→克隆化培養(yǎng)、抗體檢測篩選出單克隆的雜交→雜交瘤細胞 注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖

【解析】試題分析：單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）過程①表示給小鼠注射抗原，目的是刺激小鼠產(chǎn)生能分泌識別癌胚抗原抗體的漿細胞（B淋巴細胞）；根據(jù)單克隆抗體制備流程可知，該過程涉及到的技術(shù)有動物細胞融合技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。

（2）過程②誘導細胞融合的方法有聚乙二醇、滅活病毒、電激等；HAT選擇培養(yǎng)基的作用是篩選出雜交瘤細胞，而骨髓瘤細胞不能生長。

（3）從小鼠體內(nèi)提取的B淋巴細胞不止一種類型（篩選得到的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體不是單克隆抗體），因此經(jīng)過程③篩選得到的細胞還需轉(zhuǎn)移至多孔培養(yǎng)板中進行過程④。

（4）單克隆抗體制備過程為，將獲得的B淋巴細胞與單克隆雜交瘤細胞融合→在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交→雜交瘤細胞→克隆化培養(yǎng)、抗體檢測篩選出單克隆的雜交→雜交瘤細胞。

（5）獲得的單克隆雜交一雜交瘤細胞在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。