【題目】某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、YZ),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù)),結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細胞,需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目為40條),并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目為60條)按一定比例加入試管中,再加入聚乙二醇誘導細胞融合,經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測,得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。

回答下列問題:

1)制備融合所需的B淋巴細胞時,所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上,則小鼠最少需要經(jīng)過 次免疫后才能有符合要求的。達到要求的X、Y、Z3只免疫小鼠中,最適合用于制備B淋巴細胞的是 小鼠,理由是 。

2)細胞融合實驗完成后,融合體系中除含有未融合的細胞和雜交廇細胞外,可能還有 ,體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是 。

3)雜交瘤細胞中有 個細胞核,染色體數(shù)目最多是 條。

4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是 。

【答案】14 Y Y小鼠的血清抗體效價最高(2B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞 細胞融合是隨機的,且融合率達不到100% 31 100 不能無限增殖

【解析】

本題以雜交瘤細胞為背景,考查了動物細胞融合、細胞分裂和細胞分化。(1) 在第四次免疫后,Y的血清抗體效價大于16000,所以最少需要經(jīng)過四次免疫.由圖可知,血清抗體效價均達到 16000 以上時,Y的效價最大,最適合用于制備B淋巴細胞。(2B細胞與骨髓瘤細胞在一起融合時,可能發(fā)生B細胞與骨髓瘤細胞融合,B細胞之間的融合,骨髓瘤細胞之間的融合和B細胞與骨髓瘤細胞融合。由于細胞細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。(3)由于核膜也具有流動性,故小鼠的免疫 B 淋巴細胞核與其骨髓瘤細胞核會融合形成一個雜交的細胞核。B細胞有40條染色體,骨髓瘤細胞有60條染色體,融合后的雜交瘤細胞有100條染色體。(4)未融合的B淋巴細胞是已分化的細胞,不能無限增殖,所以多次培養(yǎng)后不能存活。

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【題目】草魚病毒性出血病是由草魚呼腸弧病毒(GCRV)引起的,草魚患病后死亡率非常高,目前尚未找到防治藥物,該問題一直是草魚養(yǎng)殖的“瓶頸”,科學家嘗試制備核酸疫苗打破該“瓶頸”,下圖是通過基因工程方法將PV7雙基因與某質(zhì)粒連接,并通過草魚攻毒實驗檢測免疫保護效果過程示意圖。回答下列問題:

草魚病毒性出血病核酸疫苗實驗魚的死亡率和免疫保護率記錄表

組別

疫苗注射量

實驗魚數(shù)

死亡魚數(shù)

死亡率

免疫保護率

1

10μg

20尾

0尾

0

100%

2

30μg

20尾

0尾

0

100%

3

60μg

20尾

1尾

5%

95%

空載體

30μg

20尾

6尾

30%

70%

對照

0

20尾

20尾

100%

0

[注:1.圖中P10和P11為啟動子,箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向 2.PV71和PV72為草魚呼腸弧病毒外殼蛋白基因(DNA片段)]

(1)DCRV的遺傳物質(zhì)是雙鏈RNA,可通過設計一對引物,通過_______技術(shù)獲取大量的PV7基因。

(2)制備草魚病毒性出血病核酸疫苗時需將PV7雙基因與質(zhì)粒進行連接,將兩個PV7基因先后連接到質(zhì)粒上時切割質(zhì)粒所使用的限制酶_____(填“相同”或“不同”),這樣做的目的有利于____________。

(3)攻毒實驗檢測是指將不同濃度的核酸疫苗導入草魚體內(nèi),通過轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)生草魚呼腸弧病毒外殼蛋白,使草魚生成抗體和_____細胞,同時給草魚注入相同濃度的GCRV,統(tǒng)計草魚免疫保護率,實驗結(jié)果說明__________,導入空載體(普通質(zhì)粒)的草魚免疫保護率到70%,但草魚體內(nèi)并未檢測到抗體水平的明顯增加,可能原因的是_________________。

(4)核酸疫苗注射入草魚_________后,科學家發(fā)現(xiàn)PV7基因在啟動子的驅(qū)動下持續(xù)表達,至第49天核酸疫苗仍沒有被降解,仍能檢測到PV7基因的轉(zhuǎn)錄,綜上所述,與常規(guī)的基因工程生產(chǎn)的蛋白質(zhì)疫苗相比,核酸疫苗所具備的優(yōu)點______________

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據(jù)圖分析,下列敘述錯誤的是(

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B、捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒

C、三親嬰兒的染色體全部來自母親提供的細胞核

D、三親嬰兒的培育還需要早期環(huán)胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)

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B. 細胞在t1時刻開始從外界溶液中吸收溶質(zhì)

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D. 若降低溫度,則t1t2時間段會變長

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