Question

【題目】小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種、培養(yǎng)及菌落觀察與計(jì)數(shù)，請回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題：

（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和_______。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是______________。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是_______________。

（2）最常用的兩種接種方法是________和_________，在培養(yǎng)過程中需要隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的________________。

（3）將放有濾膜的平板置于適宜條件下培養(yǎng)，每隔12 h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，應(yīng)選取菌落數(shù)目________時(shí)的記錄作為結(jié)果。如果經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為105的4個(gè)平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48，那么每升河水中約含大腸桿菌_____________個(gè)。用這種方法測定的細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要______________，這是因?yàn)?/span>____________________________________________。

（4）為了檢測大腸桿菌對抗生素的敏感性，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板。將分別含有A、B、C3種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，結(jié)果見下圖。根據(jù)圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好選擇的抗生素是________。若透明圈中出現(xiàn)了1個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是_____________。

Answer 1

【答案】 氮源 碳源 水和無機(jī)鹽 高壓蒸汽滅菌法 平板劃線法 稀釋涂布平板法 檢測培養(yǎng)基的配制（滅菌）是否合格 穩(wěn)定 4.5×1010 少（低） 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落 青霉素 抗性突變菌株

【解析】試題分析：微生物的培養(yǎng)基一般都要含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，如蛋白胨在培養(yǎng)基中主要作為氮源，淀粉在培養(yǎng)基中主要作為碳源；實(shí)驗(yàn)室的滅菌方法一般有灼燒滅菌（適合于接種工具的滅菌）、干熱滅菌（適合于耐高溫的、需要保持干燥的物品的滅菌）、高壓蒸汽滅菌（適合于培養(yǎng)基等物體的滅菌）。稀釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù)，其計(jì)算公式為：1毫升（克）樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（毫升），M代表稀釋倍數(shù)。

（1）根據(jù)以上分析已知，蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源，此外細(xì)菌培養(yǎng)基的成分還應(yīng)該包括水和無機(jī)鹽；微生物培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。

（2）常用的純化微生物時(shí)的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；為了檢測培養(yǎng)基的配制（滅菌）是否合格，在培養(yǎng)過程中需要隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間。

（3）統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)的菌落數(shù)目時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果；如果經(jīng)過培養(yǎng)后稀釋倍數(shù)為105的4個(gè)平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48，則平板上平均菌落數(shù)=（43+47+42+48）÷4=45個(gè)，每毫河水中約含大腸桿菌數(shù)=（C÷V）×M=（45÷0.1）×105=4.5×107個(gè)，每升河水中約含大腸桿菌數(shù)=4.5×107×103=4.5×1010個(gè)；用稀釋涂布平板法測定的細(xì)菌數(shù)量比實(shí)際活菌數(shù)量要少，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的是一個(gè)菌落。

（4）據(jù)圖分析，含青霉素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈較大，說明大腸桿菌對青霉素敏感，故為達(dá)到抗菌目的，最好選擇的抗生素是青霉素。若透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是該抗生素的抗性突變菌株。