Question

【題目】民間傳統(tǒng)酒曲中含有大量的微生物，現(xiàn)進(jìn)行下述實(shí)驗(yàn)分離酒曲中的主要微生物。

（實(shí)驗(yàn)一）將酒曲制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)每個平板的菌落特征，統(tǒng)計(jì)不同微生物的菌落數(shù)，發(fā)現(xiàn)酒曲中主要有兩類微生物，即酵母菌和霉菌。

（1）上述操作過程中的接種方法是_____。

（2）根據(jù)菌落特征鑒別微生物時，能夠觀察的菌落特征有_____。

A．形狀 B．顏色 C．表面 D．大小

在液體中，酵母菌比霉菌生長快；而酸性培養(yǎng)基中酵母菌比細(xì)菌生長更適宜。下述方案將酵母菌從酒曲中進(jìn)行了分離。

（實(shí)驗(yàn)二）用小刀切開曲塊，挖取米粒大小一塊投入酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中，然后置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩天。

（3）酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液的成分包括黃豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物質(zhì)主要是_____。

（4）上述實(shí)驗(yàn)操作中，需要滅菌的有_____。

A．酒曲 B．小刀 C．培養(yǎng)液 D．培養(yǎng)箱

（5）培養(yǎng)兩天后，可見培養(yǎng)液變渾濁，這是因?yàn)?/span>_____。

（實(shí)驗(yàn)三）取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉(zhuǎn)接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復(fù)多次。多次轉(zhuǎn)接后，取稀釋液用如圖所示方法接種在蔗糖豆芽汁平板上。

（6）與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基中少了乳酸，多了瓊脂。這種成分改變的原因是：_____。

（7）關(guān)于圖所示的接種方法的敘述，正確的是_____。

A．酒精燈提供了局部無菌環(huán)境 B．接種環(huán)正在酒精燈火焰上灼燒滅菌

C．接種后的平板需倒置培養(yǎng) D．該接種方法能得到單個菌落。

Answer 1

【答案】涂布法 ABCD 蔗糖、乳酸（或蔗糖、乳酸、黃豆芽） BC 微生物進(jìn)行繁殖，數(shù)量增加 利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行，因此需加瓊脂 ACD

【解析】

微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）要統(tǒng)計(jì)不同微生物的菌落數(shù),因此該接種方法為稀釋涂布平板法。

（2）鑒定菌種時，作為觀察的菌落特征有形狀、顏色、大小、表面是否光滑等，故選ABCD。

（3）酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液的成分包括黃豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物質(zhì)主要是蔗糖、乳酸。

（4）酒曲內(nèi)含有菌種，不能滅菌，A錯誤；小刀、培養(yǎng)液都需要嚴(yán)格滅菌，BC正確；培養(yǎng)箱需要消毒，D錯誤。

（5）培養(yǎng)兩天后，由于微生物進(jìn)行繁殖，數(shù)量增加，導(dǎo)致培養(yǎng)液變渾濁。

（6）利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行，因此需加瓊脂。

（7）接種在酒精燈附近進(jìn)行，提供了局部無菌環(huán)境，A正確；圖中接種環(huán)正在劃線，B錯誤；接種后的平板需倒置培養(yǎng)，C正確；圖示接種方法為平板劃線法，最終可以得到單個菌落，D正確。