Question

（8分）以下為人工合成reAnti基因，轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞，做成轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答

(1) 人工合成的reAnti基因可通過________      _________技術(shù)手段迅速擴增。

(2)過程③要將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞的方法是                      ，重組質(zhì)粒導(dǎo)入之后，可通過                技術(shù)，來檢測reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上。

(3)從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用                         處理，然后進行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時，將培養(yǎng)瓶置于含                                      的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素等，一般還應(yīng)添加                           。

(4)去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到                         期。其去核后與成纖維細(xì)胞通過電刺激后融合，形成重組細(xì)胞。再利用物理或化學(xué)方法刺激，使之完成細(xì)胞分裂和發(fā)育，在體外培養(yǎng)成重組早期胚胎。

(5)在進行過程⑦操作前，應(yīng)利用激素對受體母豬進行______________ _______處理。

 

Answer 1

【答案】

（1）PCR    (2)顯微注射法   DNA分子雜交 

（3）胰蛋白酶  95%的空氣和5%CO2  動物血清    （4）減數(shù)第二次分裂中期  （5）同期發(fā)情

【解析】

試題分析：（1）外源基因的快速擴增可通過PCR技術(shù)獲得。

（2）導(dǎo)入動物細(xì)胞常用的方法使顯微注射法，檢測目的基因是否導(dǎo)入可用DNA分子雜交法。

（3）將動物細(xì)胞分散開需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，培養(yǎng)時要放入到95%的空氣和5%CO2培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)液中除了營養(yǎng)物質(zhì)外還要添加動物血清。

（4）卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，才能培養(yǎng)成早期胚胎。

（5）在進行胚胎移植前對受體同期發(fā)情處理。

考點：本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的掌握及綜合運用的能力。