Question

【題目】黃曲霉素（AFB1）是由黃曲霉產(chǎn)生的具有極強(qiáng)毒性、致癌性的物質(zhì)，研究人員利用已免疫的小鼠制備抗AFB1單克隆抗體用于污染樣品中AFB1的檢測，其制備過程如圖所示，回答下列問題。

（1）免疫細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的原理是________________________，該過程中常用___________加速細(xì)胞之間的融合。

（2）甲、乙、丙中只含雜交瘤細(xì)胞的是___________，操作X具體指的是___________，該項操作的目的是____________________。

（3）利用AFB1單克隆抗體用于污染樣品中AFB1的檢測，具有其他檢測方法無法替代的優(yōu)越性，其原因是單克隆抗體具有__________的優(yōu)點。

（4）某細(xì)菌分泌的某種酶能促進(jìn)AFB1的分解，研究人員通過改造基因，替換了該酶的一個氨基酸使其活性大大提高，這項技術(shù)稱為__________。把成功改造的基因重新輸回到細(xì)菌前要用鈣離子處理細(xì)菌，用鈣離子處理的目的是__________。

Answer 1

【答案】細(xì)胞膜具有流動性 滅活的病毒 乙、丙 抗體檢測和克隆化培養(yǎng) 獲得能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞 特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備 蛋白質(zhì)工程 使細(xì)菌處于感受態(tài)

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。主要運用的細(xì)胞工程技術(shù)包括①動物細(xì)胞培養(yǎng)和②動物細(xì)胞融合，原理依次是細(xì)胞的增殖、細(xì)胞膜具有一定的流動性。

（1）動物細(xì)胞能夠融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動性，細(xì)胞膜通過流動而融合；動物細(xì)胞融合過程中常用滅活的病毒促進(jìn)細(xì)胞融合。

（2）甲、乙、丙中，甲含有雜交瘤細(xì)胞、同種細(xì)胞融合的細(xì)胞以及未融合的細(xì)胞，而經(jīng)過選擇培養(yǎng)后獲得的全部是雜交瘤細(xì)胞，因此只含有雜交瘤細(xì)胞的是乙和丙；操作X是抗體檢測和克隆化培養(yǎng)，其目的是從眾多類型的雜交瘤細(xì)胞中篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（3）單克隆抗體用于檢測物質(zhì)具有突出優(yōu)點，其原因是單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備的優(yōu)點。

（4）替換蛋白質(zhì)的氨基酸產(chǎn)生自然界中原本不存在的蛋白質(zhì)，這種技術(shù)稱為蛋白質(zhì)工程；把成功改造的基因重新輸回到細(xì)菌前要用鈣離子處理細(xì)菌，其目的是使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，（本質(zhì)上是使用細(xì)胞壁的通透性增加），使細(xì)菌處于感受態(tài)。