Question

6．（9分）某研究小組進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：

（1）將數量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數量比乙細胞數量__________。

（2）在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是___________。細胞培養(yǎng)應在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO₂的作用是____________________________。

（3）在兩種細胞生長過程中，當乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長____________。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液，需用___________消化處理。

（4）為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_______________。

（5）已知癌基因X過量表達與肝腫瘤的發(fā)生密切相關，要試驗一種抗腫瘤藥物Y對甲細胞生長的影響，可將甲細胞分為A、B兩組，A組細胞培養(yǎng)液中加入_______________，B組細胞培養(yǎng)液中加入等量無菌生理鹽水，經培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細胞，通過分別檢測X基因在A、B兩組細胞中的_______________或_______________合成水平的差異，確定Y的藥效。

Answer 1

【答案】

6. （1）多

（2）制造出與血液類似的環(huán)境。提供營養(yǎng)  

  調節(jié)pH值

（3）趨于停止 （接觸抑制）    多       膠原蛋白酶 （胰蛋白酶）

（4）抗生素

（5）Y   mRNA  蛋白質

【解析】(1) 甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。腫瘤細胞為無限增殖的細胞，細胞周期短。在相同條件下，培養(yǎng)相同的時間，甲細胞的數量多于乙細胞。 (2) 動物細胞培養(yǎng)液中必須加入動物血清，血清中含有血清蛋白、生長因子、促進細胞貼壁的因子、激素等合成培養(yǎng)基中缺乏的物質。大多數細胞培養(yǎng)液所需 pH 為 7.2 ～ 7.4 ，而多數培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉 (NaHCO3) 與 CO2 體系進行緩沖，所以 CO2 的作用是調節(jié)培養(yǎng)液 pH 。  (3) 甲為腫瘤細胞能無限增殖，傳代的次數要比乙細胞多，乙細胞 ( 正常肝細胞 ) 在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，當鋪滿瓶壁時，生長停止。為得到更多的肝細胞，需要定期地用胰蛋白酶使細胞脫離瓶壁，進行傳代培養(yǎng)。 (4) 培養(yǎng)液中加入抗生素來抑制和殺滅微生物，抗生素對動物細胞沒有影響。 (5) 設計一組加入抗癌藥物的實驗組，一組不加藥物的對照組，通過檢測藥物影響 X 基因的表達過程，即轉錄形成 mRNA 、翻譯形成蛋白質的量來檢驗藥效。