Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與果酒及果醋的制作有關(guān)的問題：

（1）在篩選純凈的酵母菌菌種時，為了更容易得到單菌落，常用_________方法。擴大培養(yǎng)時，使用的培養(yǎng)基是_________（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基，并需要提供_________（填“有氧”或“無氧”）條件。

（2）酒精發(fā)酵裝置中彎曲的安全玻璃管可以讓瓶中的二氧化碳氣體排出，還可以_________。為了制作酒精含量較高（體積分數(shù)約為15%）、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量_________。

（3）果醋發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵的進行，乙醇含量逐漸下降，這是由于醋桿菌在_________和酸性環(huán)境下將乙醇氧化為醋酸。醋桿菌產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中的pH值最低達到_________。

A.2-3 B.3-4 C.4-5 D.5-6

（二）根據(jù)以下敘述回答有關(guān)的問題：

基因敲除是針對某個序列己知但功能未知的基因，改變其基因結(jié)構(gòu)，令該基因功能喪失，從而對生物體造成影響，進而推測出該基因功能的一門技術(shù)。以下是制備基因敲除小鼠的過程示意圖。

請回答：

（1）為了獲得目的基因，可以用_______或者PCR擴增法。構(gòu)建基因敲除載體時需要的工具酶有_______。

（2）為了得到胚胎干細胞，可以用_________消化胚胎組織中的膠原纖維和細胞外的其他成分，獲得單個胚胎細胞懸浮液，然后進行原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。也可以直接將胚胎組織從機體中取出后立即進行細胞、組織培養(yǎng)，當細胞從組織塊中遷移出來，形成_________并增大后，再傳代培養(yǎng)。

（3）將囊胚移植到代孕母鼠體內(nèi)后，其外表的一層扁平細胞，將來會發(fā)育為_________。生產(chǎn)出的一只嵌合體小鼠與野生型小鼠雜交后（假設子代足夠多）_________（一定、不一定）能得到雜合子基因敲除小鼠�；�因敲除技術(shù)具有廣闊的應用前景，請舉一例_________。

Answer 1

【答案】 涂布分離法 液體 有氧 減少氧氣和雜菌進入 蔗糖 有氧（充氧） A 化學方法合成 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 胰蛋白酶 生長暈 胚胎附屬結(jié)構(gòu)或者胚外結(jié)構(gòu) 不一定 建立人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型，為醫(yī)學研究提供材料；改造動物基因型，鑒定新基因和/或其新功能，研究發(fā)育生物學；治療遺傳病，這包括去除多余基因或修飾改造原有異�；�因以達到治療的目的；改造生物、培育新的生物品種

【解析】試題分析：本題考查微生物培養(yǎng)、分離、果酒和果醋的制作、基因工程、細胞工程和胚胎工程。

（一）（1）在篩選純凈的酵母菌菌種時，涂布分離法更容易得到單菌落。液體培養(yǎng)基中菌體與營養(yǎng)物質(zhì)接觸更充分，且酵母菌有氧呼吸可以提供更多的能量，因此擴大培養(yǎng)時，應使用液體培養(yǎng)基，并需要提供有氧條件。

（2）酒精發(fā)酵裝置中彎曲的安全玻璃管可以減少氧氣和雜菌進入。制作酒精含量較高（體積分數(shù)約為15%）、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量蔗糖。

（3）醋桿菌屬于需氧菌，果醋發(fā)酵過程中，醋桿菌在有氧和酸性環(huán)境下將乙醇氧化為醋酸，所以隨著發(fā)酵的進行，乙醇含量逐漸下降。醋桿菌產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中的pH值最低達到2-3。

（二）（1）目的基因序列己知，獲得目的基因，可以用化學方法合成或者PCR擴增法。構(gòu)建基因敲除載體時需要用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。

（2）為得到胚胎干細胞，可用胰蛋白酶消化胚胎組織，獲得單個胚胎細胞懸浮液。也可以直接將胚胎組織從機體中取出后立即進行細胞、組織培養(yǎng)，當細胞從組織塊中遷移出來，形成生長暈并增大后，再傳代培養(yǎng)。

（3）將囊胚移植到代孕母鼠體內(nèi)后，其外表的一層扁平細胞為滋養(yǎng)層細胞，將來會發(fā)育為胚胎附屬結(jié)構(gòu)或者胚外結(jié)構(gòu)。由于嵌合體小鼠生殖器官中不一定含有基因敲除細胞，與野生型小鼠雜交后不一定能得到雜合子基因敲除小鼠。基因敲除技術(shù)可以用于建立人類疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型，為醫(yī)學研究提供材料；可以改造動物基因型，鑒定新基因和/或其新功能，研究發(fā)育生物學；可以治療遺傳病，包括去除多余基因或修飾改造原有異常基因以達到治療的目的；可以改造生物、培育新的生物品種。