Question

【題目】干旱是影響植物生長發(fā)育的重要因素，脫落酸（ABA)在植物應(yīng)對干旱逆境方面發(fā)揮重要的作用�？茖W(xué)家從堿蓬細胞克隆出ABA基因（圖甲），將其與質(zhì)粒（圖乙）重組，再轉(zhuǎn)入水稻植株內(nèi)。分析并回答問題：

（1）對獲取的ABA基因常用_______技術(shù)來擴增數(shù)量，該過程需要DNA模板、_______、_______和_______等物質(zhì)。

（2）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，需要________酶處理ABA基因和質(zhì)粒。常用_______法將目的基因?qū)�入水稻愈傷組織的細胞中。要將成功導(dǎo)入ABA基因并表達的水稻愈傷組織細胞篩選出來需________。

Answer 1

【答案】 PCR(多聚酶鏈式反應(yīng)） 四種脫氧核苷酸 Taq酶（耐高溫的DNA聚合酶） 引物 EcoRⅠ 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 在愈傷組織細胞的培養(yǎng)基上添加一定濃度的青霉素，能存活的細胞即是成功導(dǎo)入ABA基因并表達的細胞

【解析】本題考查基因工程的相關(guān)基因點，解題要點是識記PCR的原理和條件，識記基因工程的操作步驟。

（1）對目的基因可用PCR技術(shù)進行體外擴增；該技術(shù)所用原理是DNA復(fù)制，因此該過程需要條件有：DNA模板、原料（四種脫氧核苷酸）、酶（Taq酶）、引物等。

（2）根據(jù)甲圖和乙圖可知，目的基因所在DNA片段和運載體質(zhì)粒上都有共同的限制酶切點，可用EcoRⅠ分別處理ABA基因和質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接獲得重組質(zhì)粒；用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入水稻愈傷組織的細胞中。根據(jù)重組質(zhì)粒中所含標記基因進行篩選，即在愈傷組織細胞的培養(yǎng)基上添加一定濃度的青霉素，能存活的細胞即是成功導(dǎo)入ABA基因并表達的細胞。

[點睛]：本題考查生物工程中的基因工程相關(guān)知識點，解題思路：1. 認真閱讀材料，分析其中的關(guān)鍵語句，充分聯(lián)系教材，找到與教材的銜接點；2. 給合題文要求，對于聯(lián)系教材的有關(guān)原理、概念等，盡可能用教材語言規(guī)范答題。