Question

【題目】請(qǐng)回答下列關(guān)于固定化酶和細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的問題：

（1）某興趣小組欲利用固定化酶進(jìn)行酶解淀粉的實(shí)驗(yàn)，分組見表。

組別	固定化酶柱長(zhǎng)度（cm）	淀粉溶液的流速（mL·min-1）
甲	10	0.3
乙	10	0.5
丙	15	0.3
丁	15	0.5

將吸附了-淀粉酶的石英砂裝入柱中后，需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱，以除去_________________。按上表分組，將配制好的淀粉溶液加入到固定化酶柱中，然后取一定量的流出液進(jìn)行KI-I2檢測(cè)，若流出液呈紅色，表明有________________生成；若各組呈現(xiàn)的顏色有顯著差異，則流出液中淀粉水解產(chǎn)物濃度最高的是_____________組。

（2）下列關(guān)于上述固定化酶實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是_____________。

A.固定化酶柱長(zhǎng)度和淀粉溶液流速?zèng)Q定了酶柱中酶的含量

B.淀粉溶液流速過快會(huì)導(dǎo)致流出液中含有淀粉

C.各組實(shí)驗(yàn)所用的淀粉溶液濃度應(yīng)相同

D.淀粉溶液的pH對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響

（3）現(xiàn)有一份污水樣品，某興趣小組欲檢測(cè)其中的細(xì)菌數(shù)，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。將一定量的污水樣品進(jìn)行濃度梯度稀釋。取適量不同稀釋度的稀釋液，用______________法分別接種于固體平面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意，接種前，從盛有_____________的容器中將玻璃刮刀取出，放在酒精燈火焰上灼燒，冷卻后待用；分組時(shí)，需用_____________作為對(duì)照。

（4）在上述細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)計(jì)數(shù)的是接種了______________。

A.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)

B.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)

C.各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)

D.合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)

Answer 1

【答案】未吸附的α-淀粉酶 糊精 丙 A 涂布分離 70%酒精 未接種的培養(yǎng)基 D

【解析】

①分析表中信息：利用固定化酶進(jìn)行酶解淀粉的實(shí)驗(yàn)，自變量是固定化酶柱的長(zhǎng)度、淀粉溶液的流速，因變量是淀粉的水解產(chǎn)物糊精，可利用糊精遇KI-I2溶液顯紅色的原理對(duì)因變量進(jìn)行檢測(cè)；實(shí)驗(yàn)過程中，淀粉溶液的濃度等無關(guān)變量應(yīng)控制相同且適宜。α-淀粉酶的固定化過程中，由于α-淀粉酶不是100%地被吸附在石英砂上，因此需用蒸餾水洗去未吸附在石英砂上的α-淀粉酶。固定化酶柱越長(zhǎng)、淀粉溶液流速越慢，酶促反應(yīng)越徹底，生成的淀粉的水解產(chǎn)物越多。②對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，可采用涂布分離法進(jìn)行接種，在操作過程中需防止雜菌污染。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格，可隨機(jī)取若干滅菌后的未接種的培養(yǎng)基作為對(duì)照。

（1）由于裝入柱中的石英砂上含有未吸附的α-淀粉酶，所以需用蒸餾水充分洗滌，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；淀粉酶催化淀粉水解生成糊精，糊精與KI-I2反應(yīng)呈紅色；酶與底物反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)生的產(chǎn)物越多；丙組固定化酶柱最長(zhǎng)、淀粉溶液的流速最慢，說明固定化酶與淀粉接觸時(shí)間最長(zhǎng)，淀粉水解產(chǎn)物的濃度最高。

（2）固定化酶柱長(zhǎng)度和淀粉溶液的流速?zèng)Q定了酶與淀粉溶液反應(yīng)的時(shí)間，不能決定酶柱中酶的含量，A錯(cuò)誤；若淀粉溶液流速過快，則反應(yīng)不充分，會(huì)使部分淀粉未進(jìn)行反應(yīng)即流出，B正確；根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的等量原則，四組實(shí)驗(yàn)所用的淀粉溶液濃度應(yīng)相同，C正確；酶的活性受pH影響，D正確。

（3）對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)用涂布分離法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行接種，培養(yǎng)后根據(jù)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)；接種前玻璃刮刀需先用70%的酒精溶液進(jìn)行消毒，然后放到酒精燈上灼燒滅菌；為排除培養(yǎng)基本身對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，應(yīng)用未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照。

（4）若培養(yǎng)液稀釋不充分，則接種后培養(yǎng)基上的菌落會(huì)連成一片，不宜計(jì)數(shù)，所以應(yīng)選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)數(shù)，D項(xiàng)符合題意。