Question

【題目】回答下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)以及生物工程的問題：dMAb 技術(shù)是一種通過 DNA 編碼產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)，比傳統(tǒng)的單克隆抗體制備方法有更多的發(fā)展?jié)摿�。下圖是 dMAb 技術(shù)在埃博拉病毒感染疾病的臨床研究中的操作流程。

（1）要保證所制備的抗體能精準(zhǔn)識別埃博拉病毒抗原，在人工合成目的基因時(shí)，所需獲取的信息是_____________。

A．抗體的氨基酸序列 B．埃博拉病毒的核苷酸序列

C．抗體的核苷酸序列 D．埃博拉病毒衣殼的氨基酸序列

（2）圖中重組質(zhì)粒的構(gòu)建所需的工具酶有___________、___________。

（3）基因工程中作為運(yùn)載體的有__________、__________、___________。

（4）dMAb 也涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，下列過程描述與圖中序號相符的是________。

A．①——獲取目的基因 B．②——目的基因與運(yùn)載體重組

C．③——重組DNA 分子導(dǎo)入受體細(xì)胞 D．④——篩選含有目的基因的受體細(xì)胞

（5）傳統(tǒng)的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的過程需要運(yùn)用生物工程中的技術(shù)有 _______。（列舉一例即可）

（6）與傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)相比，dMAb 技術(shù)在抗體的制備上有何優(yōu)勢？_____________________________。（請列舉兩點(diǎn)）

Answer 1

【答案】A 限制酶 DNA 連接酶 質(zhì)粒 噬菌體衍生物 動(dòng)植物病毒 BC 細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物組織與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行，不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)；產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)胞（漿細(xì)胞）；可制備成 DNA“疫苗”，便于存儲(chǔ)和運(yùn)輸；抗體直接由 DNA 編碼產(chǎn)生，省去抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟

【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定高效地表達(dá)。為了實(shí)現(xiàn)基因工程的目標(biāo)，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等基本要素，并按照一定的程序進(jìn)行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞也稱（宿主）細(xì)胞、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)等幾個(gè)方面�；�因工程的工具包含限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和載體，載體是運(yùn)載著外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞的“車子”，即運(yùn)載工具，除質(zhì)粒外，基因工程的載體還有λ噬菌體、植物病毒和動(dòng)物病毒。單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。

（1）抗體的氨基酸序列可以推測其對應(yīng)的mRNA序列，進(jìn)一步得到DNA的序列，所以要保證所制備的抗體能精準(zhǔn)識別埃博拉病毒抗原，在人工合成目的基因時(shí)，所需獲取的信息是抗體的氨基酸序列，而不是病毒的氨基酸序列或者核苷酸序列，且這里抗體是蛋白質(zhì)，沒有核苷酸序列。故選A。

（2）限制酶是能夠識別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列的酶，可將目的基因和質(zhì)粒切割得到互補(bǔ)的粘性末端，DNA連接酶的作用是將具有末端堿基互補(bǔ)的外源基因和載體DNA連接在一起，形成的DNA分子稱為重組DNA分子，因此圖中重組質(zhì)粒的構(gòu)建所需的工具酶有限制酶和DNA 連接酶。

（3）基因工程中作為運(yùn)載體的有質(zhì)粒、噬菌體衍生物（DNA病毒/細(xì)菌病毒）、動(dòng)植物病毒。

（4）從圖中的重組質(zhì)粒的構(gòu)建和轉(zhuǎn)染到骨骼肌細(xì)胞可以看出，dMAb 也涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用如目的基因與運(yùn)載體重組、重組DNA 分子導(dǎo)入受體細(xì)胞。故選BC。

（5）傳統(tǒng)的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的過程需要運(yùn)用生物工程中的技術(shù)有細(xì)胞融合技術(shù)（骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞的融合）、動(dòng)物組織與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)）。

（6）傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體是在體外進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)從而獲得抗體，而dMAb 技術(shù)是將重組基因轉(zhuǎn)染到患者的骨骼肌細(xì)胞中，抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行，不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)；傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體是利用B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合，而dMAb 技術(shù)中產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)胞（漿細(xì)胞）；dMAb 技術(shù)是一種通過 DNA 編碼產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)，可制備成 DNA“疫苗”，便于存儲(chǔ)和運(yùn)輸；抗體直接由 DNA 編碼產(chǎn)生，省去抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟。