Question

9．圖一是培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF細(xì)胞）的示意圖，圖二是在用MEF細(xì)胞制成的飼養(yǎng)層上培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的示意圖．

（1）圖一所示，制備細(xì)胞懸液時(shí)，常用胰蛋白酶來(lái)消化剪碎的組織塊．配制培養(yǎng)液時(shí)，通常需要在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加血清（或血漿）等一些天然成分．當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)就停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
（2）ES細(xì)胞是由早期胚胎（或原始性腺）中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，ES細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）MEF細(xì)胞能夠分泌某些蛋白質(zhì)，其合成到分泌至細(xì)胞外的過(guò)程是：核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→囊泡→高爾基體→囊泡，再通過(guò)胞吐方式分泌到細(xì)胞外．在培養(yǎng)液中單獨(dú)培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，ES細(xì)胞容易發(fā)生分化，結(jié)合圖二可推知MEF細(xì)胞的作用是抑制ES細(xì)胞分化．
（4）在治療性克隆過(guò)程中，細(xì)胞核取自患者細(xì)胞，這是為了避免向患者移入組織細(xì)胞后體內(nèi)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)．
2、胚胎干細(xì)胞
（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)．
（2）具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞．另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造．
（3）胚胎干細(xì)胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律；
②是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段；
③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等；
④利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性，移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能；
⑤隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問(wèn)題．

解答 解：（1）圖一所示，制備細(xì)胞懸液時(shí)，常用胰蛋白酶來(lái)消化剪碎的組織塊，分散成單個(gè)細(xì)胞．配制培養(yǎng)液時(shí)，通常需要在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加血清或血漿等一些天然成分．當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)就停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
（2）ES細(xì)胞是由早期胚胎（或原始性腺）中分離出來(lái)的一類細(xì)胞，ES細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性．
（3）分泌蛋白合成與分泌過(guò)程：核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行粗加工→高爾基體進(jìn)行再加工→細(xì)胞膜，整個(gè)過(guò)程還需要線粒體提供能量．MEF細(xì)胞能夠分泌某些蛋白質(zhì)，其合成到分泌至細(xì)胞外的過(guò)程是：核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→囊泡→高爾基體→囊泡，再通過(guò)胞吐方式分泌到細(xì)胞外．在培養(yǎng)液中單獨(dú)培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，ES細(xì)胞容易發(fā)生分化，結(jié)合圖二可推知MEF細(xì)胞的作用是抑制ES細(xì)胞分化．
（4）在治療性克隆過(guò)程中，細(xì)胞核取自患者細(xì)胞，這是為了避免向患者移入組織細(xì)胞后體內(nèi)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．
故答案為：
（1）胰蛋白      血清（或血漿）     接觸抑制
（2）早期胚胎（或原始性腺）        全能性
（3）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)    高爾基體      胞吐        抑制ES細(xì)胞分化
（4）免疫排斥

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖示，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程、條件及相關(guān)應(yīng)用，意在考查考生的識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．