Question

【題目】某研究小組按下圖所示過程從土壤中篩選能高效降解尿素的細(xì)菌。請(qǐng)回答下列問題。

（1）步驟②是 。為了篩選目的菌，步驟③的培養(yǎng)基中加入的唯一氮源為 ，這種培養(yǎng)基屬于 （填“鑒別”或“選擇”）培養(yǎng)基。

（2）用平板劃線法接種細(xì)菌是，不需用下列哪種器具？ （填字母）。在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，原因是 。

（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的 培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，為了對(duì)初步篩選出來的菌種作進(jìn)一步的鑒定，可在培養(yǎng)基中加入 指示劑，若指示劑變成 色，則說明該菌種能夠分解尿素。

Answer 1

【答案】（1）樣品稀釋（或“系列稀釋”、“梯度稀釋”） 尿素 選擇

（2）C 避免溫度過高的接種環(huán)把菌種殺死

（3）一個(gè)為接種的（或“空白”） 酚紅 紅

【解析】

試題分析：（1）步驟②是梯度稀釋樣品。按功能不同，培養(yǎng)基可分成兩類，鑒別培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不加其它氮素，只把尿素作為唯一氮源，其目的是想從眾多微生物中選出能分解尿素的目的菌。

（2）平板劃線法接種細(xì)菌時(shí)，需要準(zhǔn)備裝有菌種的試管，接種環(huán)用于取菌種，酒精燈用于灼燒接種環(huán)滅菌等，所以本題選C（用于平板劃線法的接種鉤）。在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，原因是避免溫度過高的接種環(huán)把菌種殺死。

（3）將接種后的培養(yǎng)基和作為對(duì)照的空白培養(yǎng)基同時(shí)放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，為了對(duì)初步篩選出來的菌種作進(jìn)一步的鑒定，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，因?yàn)轶w內(nèi)目的菌的脲酶能將尿素分解成氨，氨可以作為細(xì)菌的氮源，同時(shí)會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高，升高的PH會(huì)使酚紅指示劑變?yōu)榧t色，因此可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解。

方法	平板劃線法	稀釋涂布平板法
注意事項(xiàng)	（1）接種環(huán)的灼燒：①第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物；②每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端；③劃線結(jié)束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者。 （2）灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后再進(jìn)行操作，以免溫度太高殺死菌種。 （3）劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。 （4）劃線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。	（1）稀釋操作時(shí)：每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2 cm 處 （2）涂布平板時(shí)：①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%酒精消毒，取出時(shí)，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管管頭不要接觸任何物體。
目的	在培養(yǎng)基上形成由單個(gè)菌種繁殖而來的子細(xì)胞群體——菌落
培養(yǎng)	平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染