Question

【題目】HIV（艾滋病病毒）為逆轉(zhuǎn)錄病毒，而逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏校正修復(fù)功能，因而HIV的變異頻率非常高。因此，研制安全、有效的疫苗是控制HIV傳播的重要手段之一。請(qǐng)根據(jù)相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）科學(xué)工作者利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研制 HIV疫苗取得了一定進(jìn)展，下圖是該技術(shù)的操作簡(jiǎn)要路徑（①②③表示操作步驟）：

圖中②表示_________________，目的基因的載體有__________________（答出三種）， 目的基因_______________________的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。要檢測(cè)目的基因是否插入酵母菌的DNA，可采用___________________技術(shù)，利用探針檢測(cè)酵母菌的基因，如果出現(xiàn)___________，就表明目的基因已插入酵母菌DNA中。

（2）在基因工程中將重組質(zhì)粒導(dǎo)入不同的受體細(xì)胞可采用不同的方法，若是導(dǎo)入植物細(xì)胞，采用最多的方法是______________________，若是導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，需要制備感受態(tài)細(xì)胞，原因是____________________________________________。

Answer 1

【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建 質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒、噬菌體衍生物等 進(jìn)入受體細(xì)胞并維持穩(wěn)定和表達(dá) DNA分子雜交 雜交帶 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA）的能力極弱

【解析】

基因工程的操作步驟：獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)和鑒定。據(jù)圖分析，①是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄的方法獲取目的基因的過(guò)程，②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，③是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程。

（1）根據(jù)以上分析已知，圖中②表示構(gòu)建基因表達(dá)載的過(guò)程；在基因工程中使用的載體有質(zhì)粒、噬菌體衍生物、動(dòng)植物病毒等；目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化。要檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞內(nèi)的DNA上，常用的檢測(cè)方法是采用DNA分子雜交技術(shù)，即利用含有放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段做為探針檢測(cè)受體細(xì)胞的基因，如果出現(xiàn)雜交帶，就表明目的基因已插入受體細(xì)胞DNA中。

（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞；大腸桿菌屬于微生物，由于未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA）的能力極弱，因此作為受體細(xì)胞需要經(jīng)過(guò)鈣離子處理使其處于感受態(tài)，使之更容易吸收周圍環(huán)境中的DNA