Question

【題目】已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷．人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖．將這兩種細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進(jìn)細(xì)胞融合，獲得雜種細(xì)胞，并生產(chǎn)單克隆抗體．請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：
（1）生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用效應(yīng)B淋巴細(xì)胞，主要原因是 ．
（2）①過程中，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是 ．
（3）②過程為培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO2的目的是 ．
（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是 ．
（5）為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細(xì)胞，需在③過程向培養(yǎng)液中加入 ， 理由是雜交瘤細(xì)胞可利用途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖．

Answer 1

【答案】
（1）B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖
（2）聚乙二醇
（3）細(xì)胞；維持培養(yǎng)液的pH
（4）腹腔；無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便
（5）氨基嘌呤；淋巴細(xì)胞中的S
【解析】解：（1）B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖，故生產(chǎn)單克隆抗體時(shí)，一般不直接利用一個(gè)B淋巴細(xì)胞．（2）①誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇．（3）②過程為細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體，其中通入CO2的目的主要是維持培養(yǎng)液的pH．（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)．體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便．（5）在培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，培養(yǎng)后收集增殖細(xì)胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途徑阻斷，僅有D全合成途徑的骨髓細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，淋巴細(xì)胞一般不分裂增殖．因此培養(yǎng)液中加入該物質(zhì)后，不能生長(zhǎng)的細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞、融合的淋巴細(xì)胞、融合的骨髓瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞．人淋巴細(xì)胞和骨髓癌細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞中可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖． 所以答案是：（1）B淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖；（2）聚乙二醇；（3）細(xì)胞；維持培養(yǎng)液的pH；（4）腹腔；無(wú)需再提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及無(wú)菌環(huán)境，操作簡(jiǎn)便；（5）氨基嘌呤；淋巴細(xì)胞中的S
【考點(diǎn)精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解單克隆抗體的制備的相關(guān)知識(shí)，掌握對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提��；促使它們細(xì)胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體．