日本的下村修、美國(guó)的沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。GFP會(huì)發(fā)出綠色熒光，該蛋白質(zhì)在生物工程中有著廣闊的應(yīng)用前景。請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）圖中形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。如果限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－G↓GATCC－，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－↓GATC－。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。在DNA連接酶和上述兩種不同限制酶的作用下，能否將質(zhì)粒和目的基因連接起來(lái)________理由是________。

（2）在②過(guò)程進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的篩選時(shí)，比較簡(jiǎn)易的篩選方法是通過(guò)設(shè)備檢測(cè)，發(fā)出綠色熒光的細(xì)胞即為轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞。綠色熒光蛋白在轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的________中合成，寫出這一過(guò)程包含的信息傳遞圖解：________。

（3）在③過(guò)程培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和________等。

（4）在核移植過(guò)程中，供體細(xì)胞一般選用傳代到________代以內(nèi)的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，原因是________。乙兔提供的細(xì)胞應(yīng)是________。

（5）錢永健通過(guò)改變氨基酸排序，造出能吸收、發(fā)出不同顏色光的熒光蛋白，并能讓它們發(fā)光更久、更強(qiáng)烈。對(duì)熒光蛋白的改造屬于________工程。

答案：
解析：

　�。�1）可以連接。由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同（或可以互補(bǔ)）

　�。�2）核糖體　GFP基因mRNA綠色熒光蛋白

　　（3）動(dòng)物血清或血漿

　�。�4）10　能保持細(xì)胞正常的二倍體核型�。ù渭�(jí)）卵母細(xì)胞

　�。�5）蛋白質(zhì)


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科目：高中生物 來(lái)源：2011-2012學(xué)年廣東省連州市連州中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：

(1)圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。
(2)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白
（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三個(gè)步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在                    的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                      酶。
(6)以上培育過(guò)程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))   

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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆廣東省連州市高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：

 (1)圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請(qǐng)畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。

(2)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是________________________________。

(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。

(4)目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。

①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白

（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三個(gè)步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在                     的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                       酶。

 (6)以上培育過(guò)程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))   

 

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

日本的下修村、美國(guó)的沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。GFP會(huì)發(fā)出綠色熒光，該蛋白質(zhì)在生物工程中有廣闊的應(yīng)用前景。請(qǐng)據(jù)下圖回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）①過(guò)程除了用“鳥槍法”直接提取外，還可以用       得到目的基因。③過(guò)程通常用的方法是              。

（2）將綠色熒光蛋白基因?qū)胧荏w細(xì)胞需要運(yùn)載體的幫助。選取質(zhì)粒作為運(yùn)載體的原因除了具有1至多個(gè)的限制酶切點(diǎn)、具有某些標(biāo)記基因外，還因?yàn)?u>                。

（3）經(jīng)過(guò)④過(guò)程后，有的細(xì)胞可能導(dǎo)入了重組載體，簡(jiǎn)單的鑒定方法是利用      就可以把它們篩選出來(lái)。

（4）GFP發(fā)出的熒光穩(wěn)定，檢測(cè)方便而且對(duì)細(xì)胞也不會(huì)產(chǎn)生明顯毒害，因此在基因工程中可以作為              ，用以追蹤多種生物細(xì)胞的遷移和變化情況。

（5）在核移植過(guò)程中，供體細(xì)胞一般用傳到         代以內(nèi)的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞作為受體細(xì)胞。

（6）在⑤過(guò)程培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，必須模擬細(xì)胞在體內(nèi)生存的良好環(huán)境和物質(zhì)代謝過(guò)程，為其提供必須韻營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的酸堿度、滲透壓、溫度、二氧化碳以及嚴(yán)格     條件。胚胎移植的最佳時(shí)期是           。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

日本的下村修、美國(guó)的沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。GFP會(huì)發(fā)出綠色熒光，該蛋白質(zhì)在生物工程中有著廣闊的應(yīng)用前景。請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：

 

(1)圖中形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。如果限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。在DNA連接酶和上述兩種不同限制酶的作用下，能否將質(zhì)粒和目的基因連接起來(lái)？理由是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(2)在②過(guò)程進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的篩選時(shí)，比較簡(jiǎn)易的篩選方法是通過(guò)設(shè)備檢測(cè)，發(fā)出綠色熒光的細(xì)胞即為轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞。綠色熒光蛋白在轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的________中合成，寫出這一過(guò)程包含的信息傳遞圖解：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)在③過(guò)程培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和________等。

(4)在核移植過(guò)程中，供體細(xì)胞一般選用傳代到________代以內(nèi)的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，原因是________________________________________________________________________。乙兔提供的細(xì)胞應(yīng)是________________________________________________________________________。

(5)錢永健通過(guò)改變氨基酸排序，造出能吸收、發(fā)出不同顏色光的熒光蛋白，并能讓它們發(fā)光更久、更強(qiáng)烈。對(duì)熒光蛋白的改造屬于________工程。

 

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