Question

16．供體細(xì)胞的抗原決定基因能編碼抗原或與抗原形成的關(guān)的酶，導(dǎo)致器官移植過(guò)程中出現(xiàn)免疫排斥．科學(xué)家利用基因工程方法對(duì)豬的基因組進(jìn)行改造，以解決人體移植器官的短缺和免疫排斥問(wèn)題．回答下列問(wèn)題：
（1）對(duì)豬基因組進(jìn)行改造，可以選擇某種有調(diào)控作用的目的基因，重組后導(dǎo)入愛(ài)體細(xì)胞，以達(dá)到抵制豬抗原決定基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄/轉(zhuǎn)錄和翻譯/編碼抗原/編碼與抗原形成有關(guān)的酶）的目的．進(jìn)行DNA重組時(shí)需要使用的工具酶是限制酶DNA連接酶．
（2）選擇豬胚胎干細(xì)胞作為受體細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞．將目的基因?qū)�入后，利用�?biāo)記基因的作用篩選（鑒定/選擇）含有目的基因的受體細(xì)胞．
（3）將含有目的基因的胚胎干細(xì)胞注入豬囊胚，而后將囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入受體子宮，獲得轉(zhuǎn)基因豬．
（4）采用核移植技術(shù)克隆轉(zhuǎn)基因豬時(shí)，應(yīng)選用處于MII中（減數(shù)第二次分裂中期）期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；隨后從構(gòu)建的重組胚胎中分離得到胚胎干細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)分化形成多種器官，這是利用了胚胎干細(xì)胞的發(fā)育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞特性）．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）．胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞．另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造．

解答 解：（1）對(duì)豬基因組進(jìn)行改造，可以選擇某種有調(diào)控作用的目的基因，重組后導(dǎo)入愛(ài)體細(xì)胞，以達(dá)到抵制豬抗原決定基因表達(dá)的目的，采用轉(zhuǎn)基因豬的器官進(jìn)行移植時(shí)就不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用同種限制酶切割外源DNA分子和運(yùn)載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA分子．
（2）胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎或原始性腺中分離出來(lái)的一類細(xì)胞．標(biāo)記基因的作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．
（3）將含有目的基因的胚胎干細(xì)胞注入豬囊胚，而后將囊胚通過(guò)胚胎移植技術(shù)移入受體子宮，獲得轉(zhuǎn)基因豬．
（4）采用核移植技術(shù)克隆轉(zhuǎn)基因豬時(shí)，應(yīng)選用處于MII中（減數(shù)第二次分裂中期）期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞；胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性．
故答案為：
（1）表達(dá)（轉(zhuǎn)錄/轉(zhuǎn)錄和翻譯/編碼抗原/編碼與抗原形成有關(guān)的酶）  限制酶 DNA連接酶 
（2）早期胚胎  原始性腺  篩選（鑒定/選擇）
（3）胚胎移植
（4）MII中（減數(shù)第二次分裂中期）   發(fā)育的全能性（全能性/分裂、分化能力/可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞特性）

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來(lái)源及特點(diǎn)，掌握相關(guān)工程技術(shù)的應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．