【題目】下圖為三種質(zhì)粒和一個(gè)含目的基因的片段的示意圖。復(fù)制原點(diǎn)是質(zhì)粒能正常復(fù)制的必 需組成。圖中 Ap 為氨芐青霉素抗性基因,Tc 為四環(huán)素抗性基因, lacZ 為藍(lán)色顯色基因。 EcoR Ⅰ、 PvuⅠ為相應(yīng)的限制酶切割位點(diǎn),括號(hào)內(nèi)的數(shù)據(jù)是該切點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離,單位為 kb(1 kb= 1000 個(gè)堿基對(duì)長(zhǎng)度)。請(qǐng)回答下列問題:

(1)用圖中的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)該選擇質(zhì)粒_______,選擇的限制酶 是_______。

(2)如果選擇的質(zhì)粒與目的基因重組成功,并且在受體細(xì)胞中能正常表達(dá),則所形成的重組質(zhì)粒 用 EcoRI 完全酶切,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)的片段長(zhǎng)度有___________

(3)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),可將大腸桿菌先用 處理。導(dǎo)入大腸桿菌后,為了篩選 出含目的基因的大腸桿菌,在普通瓊脂培養(yǎng)基中還需加入______,形成的菌落顏色為_______ 。

(4)如果要檢測(cè)導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),可以采用_____ 法。

【答案】B PvuⅠ 3.6kb、3.1kb1.1kb、5.6kb Ca2+(或CaCl2 氨芐青霉素 白色 抗原抗體雜交

【解析】

分析題圖:基因表達(dá)載體由啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因組成.質(zhì)粒A中缺少標(biāo)記基因,質(zhì)粒C中的復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被酶PvuⅠ切割,所以用圖中的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)該選擇質(zhì)粒B。

(1)含有目的基因的外源DNA中含有兩種限制酶的切割位點(diǎn),但用限制酶EcoRⅠ切割會(huì)破壞目的基因,因此只能選擇限制酶PvuⅠ進(jìn)行切割.質(zhì)粒A中缺少標(biāo)記基因,質(zhì)粒C中的復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被酶PvuⅠ切割,所以用圖中的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),應(yīng)該選擇質(zhì)粒B。

(2)質(zhì)粒長(zhǎng)度為2.7kb,目的基因長(zhǎng)度為4.0kb,所以重組質(zhì)粒長(zhǎng)度為6.7kb,目的基因與運(yùn)載體重組時(shí)可能會(huì)正向連接,也可能會(huì)反向連接,因此所形成的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ完全酶切,并進(jìn)行電泳觀察,可出現(xiàn)的片段長(zhǎng)度有3.6kb、3.1kb1.1kb、5.6kb。

(3)用限制酶PvuⅠ切割會(huì)破壞質(zhì)粒B中的lcZ基因,但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因,因此導(dǎo)入大腸桿菌后,為了篩選出含目的基因的大腸桿菌,在普通瓊脂培養(yǎng)基中還需加入氨芐青霉素,形成的菌落顏色為白色

(4)檢測(cè)導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì),常采用抗原-抗體雜交法。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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A. 圖 1 的 A 代表腺苷,b.c 為高能磷酸鍵

B. 圖 1 中的五碳糖為脫氧核糖,ATP 脫去兩個(gè)磷酸后的產(chǎn)物為 DNA 的基本單位

C. 圖 2 中的反應(yīng)向右進(jìn)行時(shí),常伴隨著放能反應(yīng)的進(jìn)行

D. 酶 1 和酶 2 的作用機(jī)理都是降低反應(yīng)的活化能

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A. 第0~2年兔種群數(shù)量最少

B. 第2~4年兔種群數(shù)量平穩(wěn)上升

C. 第4~6年兔種群數(shù)量保持相對(duì)穩(wěn)定

D. 第6~8年兔種群數(shù)量上升趨勢(shì)和第2~4年相同

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C. 染色體結(jié)構(gòu)變異 D. 甲可能是男性

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A. 缺失葉綠素b,植株對(duì)藍(lán)紫光、紅光吸收的能力減弱

B. 缺失胡蘿卜素,植株對(duì)藍(lán)紫光吸收的能力減弱

C. 缺失葉綠素a,植株對(duì)紅光吸收的能力減弱

D. 缺失葉黃素,植株對(duì)藍(lán)紫光吸收的能力減弱

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【題目】圖是核酸的基本組成單位,下列敘述不正確的是( )

A.m為胸腺嘧啶,則b一定是構(gòu)成DNA的基本單位

B.m為胞嘧啶,則a為核糖或脫氧核糖

C.m為尿嘧啶,則DNA中肯定不含b這種化合物

D.m為腺嘌呤,則b肯定為腺嘌呤脫氧核苷酸

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【題目】登革熱是伊蚊傳播登革熱病毒引起的一種急性傳染病,臨床特征為起病急驟,發(fā)熱等癥狀。如圖為登革熱病毒致病機(jī)理的簡(jiǎn)圖,圖中數(shù)字代表細(xì)胞,請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)圖中不能識(shí)別抗原的細(xì)胞有__(填數(shù)字)。登革熱病毒感染會(huì)使人體產(chǎn)生不同的抗體,說明登革熱病毒表面存在不同的__。

(2)登革熱病毒侵入人體后,位于__的體溫調(diào)節(jié)中樞將體溫調(diào)定點(diǎn)提高,導(dǎo)致機(jī)體發(fā)熱。若患者在連續(xù)4小時(shí)內(nèi)都保持著38攝氏度的體溫,這個(gè)過程中產(chǎn)熱量__(在“大于”、“小于”或“等于”中選擇)散熱量。

(3)物質(zhì)甲為__,該物質(zhì)和抗體Ⅰ能促進(jìn)__,使復(fù)合物增多,復(fù)合物增多又會(huì)使血管通透性增大,__外滲而引起組織水腫。

(4)沃爾巴克氏體是一種廣泛分布于節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)的共生微生物,可使雄性伊蚊不育?蒲腥藛T將大量含有沃爾巴克氏體的雄蚊釋放到自然環(huán)境中,可以直接降低白色伊蚊種群的__(填寫種群的特征),從而有效控制登革熱病毒的傳播。

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【題目】科學(xué)家將擬南芥的抗寒基因(CBFl)轉(zhuǎn)入香蕉以獲得抗寒的香蕉品種。如圖是某質(zhì)粒載體上的SacⅠ、XbaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ四種限制酶的切割位點(diǎn)示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:

(1)為構(gòu)建基因表達(dá)載體,用限制酶SacⅠ、XbaⅠ切割含目的基因的DNA片段獲得了CBFl基因,同時(shí)要用限制酶__對(duì)質(zhì)粒載體進(jìn)行切割,目的是__,這種采用雙酶切的方法構(gòu)建基因表達(dá)載體的優(yōu)點(diǎn)是使目的基因與載體__,并能防止目的基因或載體的自身環(huán)化。

(2)將CBFl基因連接到圖示質(zhì)粒后,作為基因表達(dá)載體,其組成還必須有__,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入香蕉細(xì)胞最常用的方法是__。

(3)為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有CBFl基因,可用含__的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

(4)科學(xué)家將生長(zhǎng)健壯、苗齡一致的轉(zhuǎn)基因香蕉(實(shí)驗(yàn)組)與非轉(zhuǎn)基因香蕉(對(duì)照組)進(jìn)行____處理,鑒定兩組之間的抗寒性差異,如果__,則說明獲得了抗寒的香蕉優(yōu)質(zhì)品種。

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【題目】在下列基因型個(gè)體中,各基因獨(dú)立遺傳,能產(chǎn)生八種配子的是(

A.YyRrDdB.yyRrddC.yyRRDdD.YyrrDD

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