Question

【題目】重癥綜合性免疫缺乏癥（SCID）小鼠是患有一種嚴(yán)重致死性隱性遺傳病的小鼠。該品系的腺苷脫氨酶（ADA）缺乏導(dǎo)致表現(xiàn)出嚴(yán)重的聯(lián)合免疫缺陷癥狀，B細(xì)胞核T細(xì)功能缺失。SCID小鼠是繼裸鼠（免疫缺陷動(dòng)物，先天無(wú)胸腺，缺乏T淋巴細(xì)胞）出現(xiàn)之后，人類(lèi)發(fā)現(xiàn)的又一種十分有價(jià)值的免疫缺陷動(dòng)物�？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)SCID小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如下圖所示。

（1）步驟①核移植前為獲得更多的卵母細(xì)胞，采用 處理使其超數(shù)排卵，從輸卵管中沖出的卵子處于 時(shí)期，去除卵母細(xì)胞的 （結(jié)構(gòu)）。

（2）培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中，要置于C02培養(yǎng)箱中，其中C02的主要作用是 。

（3）圖中ES細(xì)胞來(lái)自 時(shí)期的 細(xì)胞。步驟③中，需要先利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正�；�因片段，可以根據(jù)正常基因的 設(shè)計(jì)引物，PCR技術(shù)中使用的酶為 。為檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，采用的方法為 。

Answer 1

【答案】（1）促性腺激素 減Ⅱ（MⅡ）中期 細(xì)胞核

（2）維持培養(yǎng)液pH值

（3）囊胚 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 堿基（脫氧核苷酸）序列

Taq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶或耐高溫的DNA聚合酶） 抗原一抗體雜交

【解析】

試題分析：（1）使用促性腺激素可以動(dòng)物超數(shù)排卵獲得更多的卵母細(xì)胞，從輸卵管中沖出的卵子已經(jīng)發(fā)育到減Ⅱ中期，核移植前要去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。

（2）CO2可以維持培養(yǎng)液pH值。

（3圖中分離ES細(xì)胞的胚胎為囊胚期，其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育全能型。PCR技術(shù)中的引物是根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成的，使用的酶為T(mén)aq酶（熱穩(wěn)定的DNA聚合酶或耐高溫的 DNA聚合酶）。目的基因表達(dá)為合成相關(guān)的蛋白質(zhì)，因此檢測(cè)方法為抗原一抗體雜交。