Question

【題目】煙草是有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的雙子葉植物，易受TMV(煙草花葉病毒)感染而大幅度減產(chǎn)。絞股藍(lán)細(xì)胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMⅤ感染。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMⅤ煙草，操作流程如圖所示。

(1)①表示遺傳信息流動(dòng)中的___________過程，所需原料為___________。過程③所需要的工具酶是____________________________________________。

(2)大量擴(kuò)增目的基因可以使用PCR技術(shù)，該技術(shù)包括變性、退火、延伸三個(gè)步驟，變性這一驟的目的是________________________________。

(3)過程④最常用的方法是___________，過程⑤用到的細(xì)胞工程技術(shù)是___________。

(4)過程⑥還需要進(jìn)行基因工程操作步驟中的______________________，其中，在個(gè)體水平上檢驗(yàn)獲得的煙草能否抗TM的方法是_________________________________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 四種脫氧核苷酸 限制酶和DNA連接酶 使DNA解旋為單鏈（DNA解旋） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 植物組織培養(yǎng) 目的基因的檢測(cè)與鑒定 用TMV感染煙草，觀察煙草是否被感染（患�。�

【解析】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因文庫的種類，掌握兩種基因文庫的區(qū)別；識(shí)記PCR技術(shù)的條件；識(shí)記基因工程的具體操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

分析題圖：①逆轉(zhuǎn)錄，②提取目的基因，③構(gòu)建基因表達(dá)載體，④將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，⑤植物組織培養(yǎng)，⑥通過目的基因的檢測(cè)與鑒定進(jìn)行篩選。

(1) ①表示以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程，所需原料為DNA的單體：4種脫氧核苷酸。過程③構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程需要用同種限制酶切割目的基因與運(yùn)載體，用相同的DNA連接酶連接目的基因與運(yùn)載體的末端。

(2) PCR技術(shù)中的變性是利用高溫使DNA發(fā)生變性，解旋形成單鏈。

(3)過程④將目的基因?qū)�入植物體細(xì)胞的方法常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，過程⑤受體細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)得到再生植株。

(4)過程⑥從再生植株中篩選成功轉(zhuǎn)基因的抗TMV煙草植株還需要進(jìn)行基因工程操作步驟中的目的基因的檢測(cè)與鑒定；其中，若從個(gè)體水平鑒定獲得的煙草能否抗TMV，可通過接種煙草花葉病毒的方法來確定。