Question

【題目】B基因存在于水稻基因組中，僅在體細(xì)胞和精子中正常表達(dá)，在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)來(lái)獲取能夠在卵細(xì)胞中表達(dá)B基因的轉(zhuǎn)基因植株。下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（ ）

注：?jiǎn)��?dòng)子﹡指可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子；

Luc基因表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光

A.B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，可能是B基因的啟動(dòng)子在卵細(xì)胞中無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

B.可從水稻體細(xì)胞和精子中提取RNA構(gòu)建的cDNA文庫(kù)中獲得B基因中編碼蛋白的序列

C.過(guò)程②在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素以檢測(cè)T-DNA是否整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上

D.在鑒定和篩選轉(zhuǎn)基因植株時(shí)，可以檢測(cè)加入熒光素的該植株卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光

Answer 1

【答案】ABD

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：

分子水平上的檢測(cè)：

①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；

③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、啟動(dòng)子是與RNA聚合酶結(jié)合并能起始mRNA合成的序列，所以B基因在水稻卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄，可能是B基因的啟動(dòng)子在卵細(xì)胞中無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，A正確；

B、目的基因獲取途徑之一就是從cDNA文庫(kù)中獲得，B正確；

C、檢測(cè)T-DNA是否整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上，應(yīng)該用DNA分子雜交法，C錯(cuò)誤；

D、由于基因表達(dá)載體上有Luc基因，其表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光，所以在鑒定和篩選轉(zhuǎn)基因植株時(shí)，可以檢測(cè)加入熒光素的該植株卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光，D正確。

故選ABD。