Question

（10分）長(zhǎng)期以來(lái) ,香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ,制約了其發(fā)展。目前 ,隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ,為培育抗病香蕉品種開(kāi)辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示，質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：

(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶              ，對(duì)           進(jìn)行切割。

(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有                ，作為標(biāo)記基因。

（3）能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是：         (填字母序號(hào))。

A啟動(dòng)子   B終止子  C 復(fù)制原點(diǎn)   D標(biāo)記基因

（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用方法有多種，圖中所示方法為               。

（5）欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可采用的技術(shù)              (填字母序號(hào))。

A. 核酸分子雜交        B. 基因序列分析    C. 抗原-抗體雜交   D. PCR

(6)利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株。香蕉組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了含有一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還必須含有                    等植物激素，它們會(huì)在          （填圖中標(biāo)號(hào)）階段發(fā)揮作用，同時(shí)      （填圖中標(biāo)號(hào)）階段還需要給予一定光照。

（7）從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過(guò)程中，需經(jīng)過(guò)        。(填數(shù)字)

①無(wú)絲分裂    ②有絲分裂   ③減數(shù)分裂   ④ 原代培養(yǎng)   ⑤ 傳代培養(yǎng)

⑥ 植物體細(xì)胞雜交   ⑦ 細(xì)胞融合     ⑧ 脫分化      ⑨ 再分化

 

Answer 1

【答案】

（1）PstⅠ、EcoRⅠ（答全給分）含抗病基因的DNA、質(zhì)粒（答全給分）（2）抗卡那霉素基因    （3）AB   （4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法   (5) C  (6) 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素    ①和②    ②    （7）②⑧⑨

【解析】

試題分析：根據(jù)圖示，選用限制酶切割時(shí)不能破壞抗病基因，所以應(yīng)選用PstⅠ和EcoRⅠ對(duì)含有抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。因?yàn)榕囵B(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，所以如果想利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以便作為標(biāo)記基因，進(jìn)行篩選。抗病基因必需具有調(diào)控序列：?jiǎn)��?dòng)子和終止子，才能在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法。圖中采用的是最常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，可采用的方法有DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要的植物激素是：生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，在①脫分化和②再分化中發(fā)揮重要作用，在②再分化過(guò)程中需要給予一定的光照，利用芽的分化。從香蕉組織塊到獲得轉(zhuǎn)基因抗病香蕉試管苗的過(guò)程中，需經(jīng)過(guò)②有絲分裂、⑧脫分化、⑨再分化。

考點(diǎn)：本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。