Question

【題目】基因工程技術(shù)已成為生物科學(xué)的核心技術(shù)，限制酶被譽(yù)為基因工程中的“分子手術(shù)刀”．圖中的Sma I、EcoR I、BamH I、Hind III都是限制酶，圖中的箭頭表示幾種限制酶的酶切位點(diǎn)．回答下列問題：
（1）基因工程的核心是構(gòu)建 ． 用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，不能使用Sma I切割，原因是 ． 重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，原因是 ．
（2）將日的基因?qū)�入植物�?xì)胞時(shí)，采用最多的方法是 ． 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后的表達(dá)過程中，啟動(dòng)子需與識(shí)別和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程．最終目的基因是否成功翻譯咸蛋白質(zhì)，常用的方法進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品．

Answer 1

【答案】
（1）基因表達(dá)載體；SmaI會(huì)破壞質(zhì)粒中的標(biāo)記基因和外源DNA中的目的基因；它能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；RNA聚合酶；抗原﹣抗體雜交
【解析】解：（1）基因工程的核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建．質(zhì)粒抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，由圖可知，標(biāo)記基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位點(diǎn)，都可以被SmaI酶破環(huán)，故不能使用該酶剪切質(zhì)粒和含有目的基因的DNA．重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因，它能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因．（2）將日的基因?qū)�入植物�?xì)胞時(shí)，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后的表達(dá)過程中，啟動(dòng)子需與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合，從而驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程．最終目的基因是否成功翻譯咸蛋白質(zhì)，常用抗原﹣抗體雜交的方法進(jìn)行檢測(cè)，若出現(xiàn)雜交帶，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品． 所以答案是：（1）基因表達(dá)載體 SmaI會(huì)破壞質(zhì)粒中的標(biāo)記基因和外源DNA中的目的基因 它能鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 RNA聚合酶 抗原﹣抗體雜交
【考點(diǎn)精析】關(guān)于本題考查的基因工程的原理及技術(shù)，需要了解基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能得出正確答案．