Question

【題目】淀粉酶在生產(chǎn)生活中有廣泛應(yīng)用。下面是透明圈法篩選高產(chǎn)淀粉酶目標菌的示意圖�；卮鹣铝袉栴}。

（1）配制培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般都要求在含有_____等主要營養(yǎng)物質(zhì)的基砒上，還需滿足微生物生長對_______的要求。將微生物接種到已滅菌的培養(yǎng)基上，應(yīng)在_____附近進行操作。

（2）用加有可溶性淀粉的平板篩選淀粉酶產(chǎn)生菌株，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上長出甲、乙菌落，碘染后發(fā)現(xiàn)乙菌落周圍有透明圈（如圖所示），由此說明乙菌落中含有______，產(chǎn)生透明圈的原因是_______________________________。

（3）對乙菌落再用稀釋涂布平板法進一步接種培養(yǎng)，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液將___________，能對目標菌進行________和計數(shù)，從而獲取目標菌。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、無機鹽 pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣 酒精燈火焰 分解淀粉的目標菌 含淀粉的培養(yǎng)基原本不透明，但在淀粉酶的作用下，淀粉水解為單糖并為目標菌所利用，碘染后在菌落附近就出現(xiàn)透明圈了 聚集在一起的微生物分散為單個細胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌的菌落 分離、純化

【解析】

微生物的培養(yǎng)需要提供的基本營養(yǎng)物質(zhì)：碳源（提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)）、氮源（提供所需氮元素所需的營養(yǎng)物質(zhì)）、水、無機鹽、特殊營養(yǎng)物質(zhì)——生長因子（維生素、氨基酸、堿基等），微生物培養(yǎng)所需的條件：pH、氧氣條件、特殊營養(yǎng)等；為了防止微生物的感染，實驗操作過程應(yīng)在無菌條件下完成——在酒精燈火焰旁操作；透明圈法的基本原理：含有可溶性淀粉的培養(yǎng)基中培養(yǎng)微生物，生出菌落后，將菌落用碘液處理，若菌種能產(chǎn)生淀粉酶，則其附近的淀粉被水解為還原糖，因此會出現(xiàn)“透明圈”；統(tǒng)計菌落數(shù)目時，若樣品的稀釋度足夠高，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能測出樣品大約的活菌數(shù)。

（1）培養(yǎng)基的成分包括水、碳源、氮源、無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，以及pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣條件等。

（2）乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落含有分解淀粉的目標菌，故應(yīng)選擇乙菌落進一步純化從而得到目標菌。

（3）對乙菌落再用稀釋涂布平板法進一步接種培養(yǎng)，由于此方法用稀釋度足夠高的菌液聚集在一起的微生物分散為單個細胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌的菌落，能對目標菌進行分離、純化和計數(shù)、從而獲取目標菌。