Question

【題目】2，4-D是一類(lèi)廣泛應(yīng)用于單子葉作物田間的除草劑，其大量施用導(dǎo)致土壤污染。某研究小組欲從2，4-D污染土壤樣品中篩選2，4-D降解菌株，采集土樣后進(jìn)行如圖操作：

富集培養(yǎng)1組培養(yǎng)液成分：基礎(chǔ)無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液+葡萄糖+2，4-D

富集培養(yǎng)2組培養(yǎng)液成分：基礎(chǔ)無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液+2，4-D

基礎(chǔ)無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液成分：MgSO4、（NH4）2SO4、FeS4、KH2PO4，Na2HPO4

回答下列問(wèn)題。

（1）微生物實(shí)驗(yàn)要嚴(yán)格防止雜菌污染，劃線純化時(shí)對(duì)接種環(huán)可采用________滅菌。

（2）在特定環(huán)境中只讓一種來(lái)自同一祖先的微生物群體生存的技術(shù)叫作純化。純化接種的方法有________和平板劃線法。純化培養(yǎng)時(shí)，需在基礎(chǔ)無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中添加以2，4-D為唯一碳源，還要添加_______。

（3）富集培養(yǎng)目的是_____，富集培養(yǎng)________（填“1”或“2”）組菌落數(shù)多，判斷依據(jù)是______。

（4）欲檢測(cè)所獲得的不同菌株對(duì)2，4-D降解能力大小，可將目的菌分別接種在相同濃度的2，4-D培養(yǎng)液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢測(cè)_____，評(píng)估其降解能力。

Answer 1

【答案】灼燒 稀釋涂布平板法 瓊脂 增加目的菌（2，4-D降解菌）的濃度 1 2組只有能利用2，4-D作碳源的微生物可以繁殖，而1組能利用葡萄糖和2，4-D作碳源的微生物均可繁殖 2，4-D剩余量（或2，4-D降解率、2，4-D的降解產(chǎn)物）

【解析】

從微生物的混合物中篩選目的微生物需要使用選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)需求或其對(duì)某種化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備的培養(yǎng)基，能提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)欲從2，4-D污染土壤樣品中篩選2，4-D降解菌株，因此需要利用以2，4-D為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌。

（1）微生物實(shí)驗(yàn)要嚴(yán)格防止雜菌污染，劃線純化時(shí)每一次劃線前都要對(duì)接種環(huán)采用灼燒滅菌。

（2）微生物接種的方法很多，常用的純化接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。純化培養(yǎng)時(shí)一般使用固體選擇培養(yǎng)基，除在基礎(chǔ)無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)液中添加以2，4-D為唯一碳源外，還要添加凝固劑瓊脂。

（3）富集培養(yǎng)目的是增加目的菌（2，4-D降解菌）的濃度，以確保能從樣品中分離所需微生物。比較兩組培養(yǎng)基成分可知，差異在于富集培養(yǎng)1組中含有葡萄糖而2組沒(méi)有，因此1組中能利用葡萄糖和2，4-D作碳源的微生物均可繁殖，而2組只有能利用2，4-D作碳源的微生物可以繁殖，則富集培養(yǎng)1組菌落數(shù)較多。

（4）欲檢測(cè)所獲得的不同菌株對(duì)2，4-D的降解能力大小，可將目的菌分別接種在相同濃度的2，4-D培養(yǎng)液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢測(cè)培養(yǎng)液中的2，4-D的剩余量，剩余量最低的菌株降解能力最強(qiáng)。