Question

【題目】請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答下列問題：

（1）將實驗流程按先后順序補充完整：_______________、_______________。

（2）凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_______________________分離蛋白質(zhì)。

（3）洗滌紅細胞的目的是去除______________,洗滌干凈的標志是_____________________。為防止血液凝固，在采血容器中通常要預(yù)先加入____________（抗凝劑）。

（4）下圖是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品加入過程的示意圖,正確的加樣順序是________。

（5）在裝填色譜柱時不能有氣泡存在，因為_________________________________________，降低分離效果。如果______________________________，說明色譜柱制作成功。

Answer 1

【答案】血紅蛋白的釋放 凝膠色譜柱的裝填 相對分子質(zhì)量的大小 雜蛋白（或血漿蛋白） 離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色 檸檬酸鈉 ④①②③ 氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 紅色區(qū)帶均勻一致地移動

【解析】

本題以圖文結(jié)合為情境，考查學(xué)生對血紅蛋白的提取和分離的相關(guān)知識的識記和理解能力，以及識圖分析能力。

(1) 血紅蛋白的提取和分離流程為：紅細胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫�？梢�，A表示血紅蛋白的釋放，B表示凝膠色譜柱的裝填。

(2) 凝膠色譜法的基本原理是：根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。

(3) 洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。洗滌干凈的標志是離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色。為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血劑檸檬酸鈉，其比例是每100 mL血液加入3.0 g檸檬酸鈉。

(4) 加樣順序是調(diào)整緩沖液面、滴加透析樣品、樣品滲入凝膠床、再調(diào)整緩沖液面，即④①②③。

(5) 由于氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，所以在裝填凝膠色譜柱時，不得有氣泡產(chǎn)生。在蛋白質(zhì)分離過程中，如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動，說明色譜柱制作成功。