據(jù)報道,我國內(nèi)蒙古大學生命科學學院實驗動物研究中心的科研人員,成功培育成了國際上規(guī)模最大的一批轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊。研究過程中,科研人員首先成功構建了對絨毛生長有促進作用的轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGFⅠ)基因載體,利用該載體成功轉(zhuǎn)染了絨山羊胎兒成纖維細胞,建立起轉(zhuǎn)基因細胞系。再利用轉(zhuǎn)基因細胞進行體細胞克隆,從而獲得轉(zhuǎn)基因絨山羊。
請根據(jù)以上資料,回答下列問題。
(1)科研人員構建轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGFⅠ)基因載體的過程中必須用到的工具酶有 。
(2)用絨山羊胎兒成纖維細胞建立轉(zhuǎn)基因細胞系必須用動物細胞培養(yǎng)技術,動物細胞培養(yǎng)液中除含葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素外,還必須加入的成分是 。在動物細胞培養(yǎng)過程中要不斷使用的一種工具酶是 ,目的是使細胞分散開。
(3)轉(zhuǎn)基因絨山羊的培育過程大致為:將轉(zhuǎn)基因細胞的 注入普通絨山羊的 卵細胞內(nèi),經(jīng)過某種刺激和培養(yǎng)后,可形成胚胎,將該胚胎移入代孕母絨山羊的 中,通過培育可達到目的。
答案:(1)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 (2)動物血清 胰蛋白酶 (3)細胞核 去核 子宮
解析:(1)由題意可知,構建轉(zhuǎn)胰島素樣生長因子Ⅰ(IGFⅠ)基因載體(即目的基因與運載體結(jié)合)的過程中,要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種工具酶。(2)動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液中必須有動物血清,在培養(yǎng)過程中為使細胞分散開來,常用胰蛋白酶進行處理。(3)要培育出轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊,應將轉(zhuǎn)基因細胞的細胞核移入去核的成熟卵細胞內(nèi),經(jīng)體外培養(yǎng)形成初期胚胎后再植入母山羊的子宮內(nèi)發(fā)育。
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