Question

【題目】新型冠狀病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原。研究人員為研制S蛋白疫苗，做了如下實驗，請回答：

（1）過程①是______________，過程②是______________，過程③常用的方法是______________。

（2）采用PCR技術獲得大量的S基因進行體外擴增，其前提是____________________________，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR過程所需的酶是____________________。

（3）通過上述過程⑥得到的蛋白制備的疫苗比④效果更好，從細胞結構差異的角度分析，原因是___________。

（4）利用S蛋白為抗原制備單克隆抗體，運用的生物工程技術有____________________________。（答出一項即可）

Answer 1

【答案】逆轉錄 基因表達載體的構建 鈣離子誘導法 有一段已知的S基因的核苷酸序列 Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶） 真核細胞具有內質網(wǎng)、高爾基體，可以對核糖體合成的多肽鏈進行剪切、折疊、加工、修飾等處理 動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)

【解析】

基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的獲取

第二步：基因表達載體的構建

①目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

②組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因+復制原點

第三步：將目的基因導入受體細胞

第四步：目的基因的檢測和表達

①首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子雜交技術。

②其次還要檢測目的基因是否轉錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與 mRNA雜交。

③最后檢測 目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是從轉基因生物中提取 蛋白質，用相應的 抗體進行抗原-抗體雜交。

（1）由圖可知，過程①是RNA合成DNA的過程，為逆轉錄，過程②是基因表達載體的構建，過程③是把目的基因導入受體細胞，受體細胞為細菌，常用的方法是鈣離子誘導法。

（2）采用PCR技術獲得大量的S基因進行體外擴增，其前提是有一段已知的S基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR過程所需的酶是Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）。

（3）通過上述過程⑥是通過真核細胞得到的蛋白制備的疫苗比④細菌作為受體細胞得到的疫苗效果更好，從細胞結構差異的角度分析，原因是真核細胞具有內質網(wǎng)、高爾基體，可以對核糖體合成的多肽鏈進行剪切、折疊、加工、修飾等處理。

（4）利用S蛋白為抗原制備單克隆抗體，運用的生物工程技術有動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)。