Question

【題目】資料顯示，中國(guó)每年約有13萬(wàn)新增宮頸癌病例，占全球新發(fā)病例的三分之一，其中約有8萬(wàn)女性去世。宮頸癌也是中國(guó)15歲至44歲女性中的第二大高發(fā)癌癥。人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(1)單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有_________________________。

(2)對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)/ mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液_____ mL，使每個(gè)孔內(nèi)細(xì)胞一般不多于一個(gè)，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

(3)由上述過(guò)程生產(chǎn)出的單克隆抗體一般不能直接用于人體，理由是____________________。

(4)科學(xué)家從某些無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的制備單克隆抗體技術(shù)外，請(qǐng)?jiān)俸?jiǎn)要寫出一種制備單克隆抗體的思路。_______________________________________。

(5)利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)抗HPV抗體進(jìn)行改造以延長(zhǎng)其體外保存的時(shí)間，其基本途徑是從_________________出發(fā)，設(shè)計(jì)_________________，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，進(jìn)而確定對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得相應(yīng)基因。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合 0.1 小鼠形成的抗體對(duì)人體來(lái)說(shuō)是抗原，存在著排異反應(yīng) 通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG；(或：利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中) 預(yù)期蛋白質(zhì)（抗HPV抗體）的功能 蛋白質(zhì)（抗HPV抗體）的結(jié)構(gòu)

【解析】

動(dòng)物細(xì)胞融合指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜種細(xì)胞。

單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞；第二次用專一抗體檢測(cè)得到能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

（1）單克隆抗體制備過(guò)程中需要經(jīng)過(guò)瘤細(xì)胞和漿細(xì)胞的融合及雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，故需要經(jīng)過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的融合。

（2）對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)/ mL，即每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1mL，使每個(gè)孔內(nèi)細(xì)胞一般不多于一個(gè)，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。

（3）由于來(lái)自于小鼠的抗體對(duì)人體來(lái)說(shuō)是抗原，存在著排異反應(yīng)，故一般不能直接用于人體。

（4）科學(xué)家從某些無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG)，可以通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG，獲得能無(wú)限增殖又可以產(chǎn)生特定抗體的漿細(xì)胞。

（5）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，進(jìn)而確定對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得相應(yīng)基因。