Question

【題目】（四）回答關于微生物的問題。

民間傳統(tǒng)酒曲中含有大量的微生物，現(xiàn)進行下述實驗分離酒曲中的主要微生物。

【實驗一】將酒曲制成懸液后，分別取不同稀釋度的酒曲懸液接種到GPDA培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后根據(jù)每個平板的菌落特征，統(tǒng)計不同微生物的菌落數(shù)，發(fā)現(xiàn)酒曲中主要有兩類微生物，即酵母菌和霉菌。

在液體中，酵母菌比霉菌生長快；而酸性培養(yǎng)基中酵母菌比細菌生長更適宜。下述方案將酵母菌從酒曲中進行了分離。

【實驗二】用小刀切開曲塊，挖取米粒大小一塊投入酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中，然后置于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)兩天。

【實驗三】取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉(zhuǎn)接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復多次。多次轉(zhuǎn)接后，取稀釋液用圖所示方法接種在蔗糖豆芽汁平板上。

【1】上述操作過程中的接種方法是______________。

【2】根據(jù)菌落特征鑒別微生物時，能夠觀察的菌落特征有_____________（多選）。

A. 形狀 B. 顏色 C. 表面 D. 大小

【3】酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液的成分包括黃豆芽、蔗糖、乳酸和水，其中碳源物質(zhì)主要是__________。

【4】上述實驗操作中，需要滅菌的有_________（多選）。

A. 酒曲 B. 小刀 C. 培養(yǎng)液 D. 培養(yǎng)箱

【5】培養(yǎng)兩天后，可見培養(yǎng)液變渾濁，這是因為____________________________。

【6】與酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液成分相比，蔗糖豆芽汁平板培養(yǎng)基中少了乳酸，多了瓊脂。這種成分改變的原因是：__________________________________________________________________。

【7】關于圖所示的接種方法的敘述，正確的是_____________（多選）。

A. 酒精燈提供了局部無菌環(huán)境

B. 接種環(huán)正在酒精燈火焰上灼燒滅菌

C. 接種后的平板需倒置培養(yǎng)

D. 該接種方法能得到單個菌落

Answer 1

【答案】

【1】涂布法

【2】ABCD

【3】蔗糖、乳酸（或蔗糖、乳酸、黃豆芽）

【4】BC

【5】微生物進行繁殖，數(shù)量增加

【6】利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進行，因此需加瓊脂

【7】ACD

【解析】微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括體液、氮源、水和二氧化碳等；分離和純化微生物的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法。

【1】根據(jù)實驗三分析，取渾濁的培養(yǎng)液1mL轉(zhuǎn)接到另一瓶酸性蔗糖豆芽汁培養(yǎng)液中并培養(yǎng)，如此重復多次，因此該接種方法為稀釋涂布平板法。

【2】鑒定菌種時，作為觀察的菌落特征有形狀、顏色、大小、表面是否光滑等，故選ABCD。

【3】蔗糖、乳酸、黃豆芽都可以為微生物提供碳源。

【4】酒曲內(nèi)含有菌種，不能滅菌，A錯誤；小刀、培養(yǎng)液都需要嚴格滅菌，BC正確；培養(yǎng)箱需要消毒，D錯誤。

【5】培養(yǎng)兩天后，由于微生物進行繁殖，數(shù)量增加，導致培養(yǎng)液變渾濁。

【6】利用酵母菌在酸性液體培養(yǎng)基中的生長優(yōu)勢，通過多次轉(zhuǎn)接，已篩選出酵母菌，因此不必再用酸性培養(yǎng)液；此時通過劃線要分離酵母菌，此操作需要在固體培養(yǎng)基上進行，因此需加瓊脂。

【7】接種在酒精燈附近進行，提供了局部無菌環(huán)境，A正確；圖中接種環(huán)正在劃線，B錯誤；接種后的平板需倒置培養(yǎng)，C正確；圖示接種方法為平板劃線法，最終可以得到單個菌落，D正確。