38.【生物—生物技術(shù)實踐】(本題共15分)

某中學楊老師自制大蒜提取液,希望這種簡便、經(jīng)濟的提取液能夠高效的殺滅餐具上的細菌,楊老師完成了下面的探究實驗:

(1)制作提取液:楊老師將大蒜榨汁后制成提取液,具體做法如下表所示。請根據(jù)表中數(shù)據(jù),在表中的括號內(nèi)填出1#提取液應(yīng)加入的冷開水量:

大蒜提取液編號

1#

2#

大蒜(g)

350

350

冷開水(mL)

(   )

880

無色食醋(mL)

/

20

(2)使用方法:將餐具浸泡在提取液中10min后取出沖洗。

(3)樣品抽。簩⒔(jīng)過         處理的濾紙貼在餐具表面1min,然后再將濾紙放到50ml無菌水中,充分振蕩后制成原液。再取1ml原液加入    ml無菌水中搖勻制成10倍稀釋液。

(4)分離及培養(yǎng):用       分離法分離細菌。分別取1ml原液和10倍稀釋液,分別加到伊紅-美藍培養(yǎng)基中,用滅菌、消毒后的          (用具),將原液和稀釋液均勻涂布到整個平板上。每個濃度各做三個培養(yǎng)皿,其目的是                    。本實驗另設(shè)1ml無菌水涂布在未接種的培養(yǎng)皿為空白對照,原因是排除           。最后在37℃培養(yǎng)48h。

(5)觀察記錄:在下面的空白處,設(shè)計1#提取液實驗組的觀察記錄表:(2分)

(6)結(jié)果分析:統(tǒng)計數(shù)據(jù),得到消毒前后的菌落總數(shù)變化(單位cfu/cm2,每平方厘米樣品中含有的細菌群落總數(shù))(每空2分)

總份數(shù)

<1

1-10

10-102

102-103

103-104

>104

1#提取液

消毒前

30

0

0

0

3

18

9

消毒后

30

14

12

4

0

0

0

2#提取液

消毒前

33

2

0

0

3

12

16

消毒后

33

19

10

4

0

0

0

根據(jù)消毒前后的數(shù)據(jù)可知:                               

2#提取液效果高于1#,分析可能的原因:                                      

請你給楊老師提出需要進一步研究的問題:                                   。

【答案】(1)900        (3)滅菌;9ml

(4)涂布分離(稀釋涂布平板)(只寫“涂布”不得分) 玻璃刮刀(三角刮刀、涂布器);重復(fù)實驗,減小實驗誤差;滅菌不徹底對本實驗的影響

(5)(原液、稀釋液1分;平均值1分) (2分)

菌  落  數(shù)

1號培養(yǎng)皿

2號培養(yǎng)皿

3號培養(yǎng)皿

平均值

原  液

10-1稀釋液

(6)(每空2分)大蒜提取液能夠高效殺菌;無色食醋促使大蒜提取液成微酸性,協(xié)同殺菌

(如:①進一步探究同等條件下,醋和蒜汁哪種消毒作用更好?②不同濃度的大蒜汁,哪種消毒效果更好?③醋作用的最適PH?)

【解析】1#與2#只有一個變量不同,即無色食醋,其余的量都應(yīng)該是相同的。將濾紙無菌處理,可避免濾紙上所帶細菌對實驗結(jié)果的影響。要制成10倍稀釋液,因此1ml原液加入9ml無菌水。分離細菌多用涂布分離(稀釋涂布平板法)分離,用滅菌、消毒后的玻璃刮刀(三角刮刀、涂布器),將原液和稀釋液均勻涂布到整個平板上,每個濃度多做幾組實驗以減少誤差。本實驗另設(shè)1ml無菌水涂布在未接種的培養(yǎng)皿為空白對照,以排除滅菌不徹底對本實驗的影響。由圖中數(shù)據(jù)可以看出大蒜提取液能夠高效殺菌,而且有無色食醋的情況下,殺菌效果更好。本實驗只探究了醋和蒜汁的有無對殺菌效果的影響,沒有考慮濃度、PH值等的影響,這可以做為下一步的探究方向。

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【生物——生物技術(shù)實踐】如圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖,請據(jù)圖回答:

(1)制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料,原因是                          。

(2)制備泡菜的鹽水中清水與鹽的質(zhì)量比約為                  ,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用,原因是                                          。

(3)泡菜的制作方法不當,很容易造成泡菜變質(zhì),甚至發(fā)霉變味,試分析可能的原因:

                                                                             

(4)測定亞硝酸鹽含量的方法是 

                                            。

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34.(8分)【生物——生物技術(shù)實踐】

請回答下列生物技術(shù)方面的問題:

  (1)測定亞硝酸鹽含量的操作程序是:①配制溶液;②________________;③________________;④比色。泡菜發(fā)酵過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽在鹽酸酸化條件下,與對氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽偶聯(lián)成________________色化合物。

  (2)為獲得一種能高效降解農(nóng)藥的細菌(目的菌),向培養(yǎng)基中加入某種化合物,將初步篩選得到的目的菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基中,常采用的接種方法是________________;實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行處理后再倒掉,這樣做是為了________________。

  (3)研究發(fā)現(xiàn),固定化強度強的酵母顆粒發(fā)酵效果好,且穩(wěn)定性高、使用壽命長。某機構(gòu)利用上述裝置,將2%、2.5%、3%的海藻酸鈉分別利用2%、3%、4%的X溶液進行凝膠化處理,所得到的固定化酵母顆粒的強度及在28℃下發(fā)酵48h后的酒精產(chǎn)量見下表:

由表格內(nèi)容可以看出,隨著X溶液濃度的增加,________________增加;凝膠固定化效果較好和酒精產(chǎn)量較大的海藻酸鈉與X溶液濃度分別是________________、________________。

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34.(8分)【生物—生物技術(shù)實踐】

  微生物強化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油,增大石油的乳化度,降低石油粘度的原理,通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請回答下列問題:

(1)土壤是微生物的大本營,該類微生物應(yīng)取自 ___________ 的土壤。

(2)為篩選和純化該類微生物,從功能上分,應(yīng)選用 ___________ 培養(yǎng)基。常用的接種方法 ___________ 和        。

(3)接種后,應(yīng)密封培養(yǎng)的原因是___________ ,培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上形成降油圈,此時選取___________ 就可獲得高效菌株。

(4)擴大培養(yǎng)過程中需要對微生物進行計數(shù)。取0.2mL樣品,用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng),最后統(tǒng)計三個平板,菌落數(shù)分別是200、180、220。則樣品中微生物的數(shù)量為 ___________ 個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果 ___________ (低于、高于)實際值。

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(1)為獲得一種能高效降解農(nóng)藥的細菌(目的菌),向培養(yǎng)基中加入某種化合物,將初步篩選得到的目的菌轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基中,常采用的接種方法是      ;實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行處理后才能倒掉,這樣做是為了_______________________ 。
(2)月季的花藥培養(yǎng)一般選擇       期花藥培養(yǎng)成功率最高。
(3)水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法,其中的       法對于提取檸檬芳香油不適應(yīng),原因是_________________________;用萃取法提取胡蘿卜素,萃取的效率主要取決于________________,提取的胡蘿卜素粗品可通過        法進行鑒定。

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生物柴油是一種可再生的清潔能源,其應(yīng)用在一定程度上能夠減緩人類對化石燃料的消耗,科學家發(fā)現(xiàn),在微生物M產(chǎn)生的脂肪酶作用下,植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油(如下圖)。

(1)用于生產(chǎn)生物柴油的植物油不易發(fā)揮,宜選用_____、_____方法從油料作物中提取。
(2)篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時,選擇培養(yǎng)基中的添加的植物油為微生物生長提供____,培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是____法。
(3)測定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量,可選用_____法直接計數(shù);從微生物M分離提取的脂肪酶通常需要檢測______,以確定其應(yīng)用價值;為降低生物柴油生產(chǎn)技術(shù),可利用______技術(shù)使脂肪酶能夠重復(fù)使用。
(4)若需克隆脂肪酶基因,可應(yīng)用耐熱DNA聚合酶催化的_____技術(shù)。

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