【題目】 1 是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖,載體 質(zhì)粒 P0 具有四環(huán)素 抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

1EcoR V 酶切位點(diǎn)為,EcoR V 酶切出來(lái)的線性載體 P1 __________未端。

2)用 Taq DNA 聚合酶進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個(gè)腺 嘌呤脫氧核苷酸。載體 P1 用酶處理,在兩端各添加了一個(gè)堿基為___________ 脫氧核苷酸,形成 P2;P2 和目的基因片段在__________酶作用下,形成重組質(zhì) P3。

3)為篩選出含有重組質(zhì)粒 P3 的菌落,采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選,得到 A、BC 三類菌落,其生長(zhǎng)情況如下表(“+”代表生長(zhǎng),“﹣”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表 中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是_____(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、___________________。

菌落類型

平板類型

A

B

C

無(wú)抗生素

氨芐青霉素

四環(huán)素

氨芐青霉素+四環(huán)素

4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 PCR 鑒定。圖 2 所示為甲、乙、丙 3 條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR 鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是____________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一 菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了 400 bp 片段,原因是_______________

【答案】 胸腺嘧啶(T) DNA連接 B A類菌落含有PO C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒 乙丙 目的基因反向連接

【解析】

基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析,P0是載體質(zhì)粒,其含有的氨芐青霉素抗性基因(ampr)和四環(huán)素抗性基因(tetr)都屬于標(biāo)記基因,可以用檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞;EcoRV酶為限制酶,其切割質(zhì)粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因(tetr)。

1)根據(jù)題意分析,EcoRV 酶識(shí)別的序列是-GATATC-,并且兩條鏈都在中間的TA之間進(jìn)行切割,因此其切出來(lái)的線性載體P1為平末端。

2)據(jù)圖分析,目的基因兩側(cè)為粘性末端,且漏出的堿基為A,則在載體P1的兩端需要個(gè)加一個(gè)堿基T形成具有粘性末端的載體P2,再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來(lái)形成重組質(zhì)粒P3

3)根據(jù)以上分析已知,限制酶切割后破壞了四環(huán)素抗性基因,但是沒有破壞氨芐青霉素抗性基因,因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在四環(huán)素中應(yīng)該不能生長(zhǎng),而在氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),結(jié)合表格分析可知,應(yīng)該選擇B類菌落。根據(jù)表格分析,A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長(zhǎng),說(shuō)明其導(dǎo)入的是P0; C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長(zhǎng),說(shuō)明其沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒。

4)據(jù)圖分析,根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析,PCR 鑒定時(shí)應(yīng)該選擇的一對(duì)引物是乙和丙:根據(jù)題意和圖形分析,某同學(xué)用圖中的另外一對(duì)引物(甲、乙)從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp的片段,說(shuō)明其目的基因發(fā)生了反向連接。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖為科研工作者利用小鼠制備H7N9禽流感病毒單克隆抗體的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題。

1)誘導(dǎo)X細(xì)胞和Y細(xì)胞融合可采用化學(xué)試劑_________、輔助________________等物理方法、還可用__________________誘導(dǎo)其融合。

2)在雜種細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中,為了防止污染,通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的________,其培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比,特有的天然成分________。

3)單克隆抗體的制備過(guò)程需要經(jīng)過(guò)多次篩選,首先用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出_________,還需進(jìn)行________________和專一抗體檢測(cè),最終獲得足夠數(shù)量的________________的細(xì)胞,選出符合要求的細(xì)胞后,可在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)進(jìn)行增殖。

4)利用上述技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體可制作成診斷盒,用于準(zhǔn)確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者,這種診斷運(yùn)用了____________雜交技術(shù),這體現(xiàn)了單克隆抗體______________的特性。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】治療性克隆有望最終解決供體器官的短缺和器官移植出現(xiàn)的排斥反應(yīng)。下圖表示治療性克隆的過(guò)程,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

A.上述過(guò)程利用了動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)

B.上述過(guò)程充分說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性

C.由圖可以看出胚胎干細(xì)胞可誘導(dǎo)成多種體細(xì)胞

D.①、②過(guò)程都發(fā)生DNA復(fù)制,轉(zhuǎn)錄和翻譯

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】百合以氣孔白天關(guān)閉、夜間開放的特殊方式適應(yīng)高溫干旱環(huán)境。下面為百合葉肉細(xì)胞內(nèi)的部分代謝示意圖,據(jù)圖分析正確的是(

A.圖中B物質(zhì)可能是葡萄糖B.線粒體和細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)均能產(chǎn)生CO2

C.PEP、RuBP均能與CO2結(jié)合D.夜間細(xì)胞液pH可能會(huì)下降

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】抗體的結(jié)構(gòu)如圖所示,它由兩條H鏈和兩條L鏈組成。同一物種C區(qū)氨基酸序列恒定,不同抗體結(jié)合抗原的V區(qū)氨基酸序列有差異。

1)在生物體內(nèi),抗體是由________細(xì)胞分泌的,該細(xì)胞可以來(lái)自____________增殖分化。

2)傳統(tǒng)方法獲取抗體時(shí),需要將相應(yīng)的抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi),從動(dòng)物的血清中分離。顯然,這種方法產(chǎn)生的抗體量和純度等都很低特異性差,單克隆抗體的出現(xiàn),克服了傳統(tǒng)抗體的不足,單克隆抗體是指________________。

3)天然的抗體左右兩個(gè)V區(qū)結(jié)構(gòu)完全相同,只能結(jié)合相同的抗原。通過(guò)一定技術(shù)手段可以得到雙功能抗體(又叫雙特異性抗體),它的兩個(gè)V區(qū)能結(jié)合不同的抗原。制備雙功能抗體的基本方法如下:將能分泌抗體1的雜交瘤細(xì)胞(A細(xì)胞)與能分泌抗體2的淋巴細(xì)胞(B細(xì)胞)進(jìn)行融合,形成可分泌兩種親代抗體和雜種抗體的雜種雜交瘤細(xì)胞(A—B)。細(xì)胞融合時(shí)需要用_______________、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo),融合后總共應(yīng)該有______________種細(xì)胞(最多考慮兩兩融合)。

4)雙功能抗體在癌癥治療中可作為生物導(dǎo)彈:用其中一個(gè)V區(qū)識(shí)別癌細(xì)胞表面_________,用另一個(gè)V區(qū)將T細(xì)胞等殺傷細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在的位置,這里,T細(xì)胞對(duì)癌細(xì)胞的攻擊屬于____免疫。

5)細(xì)胞融合方法得到的雙功能抗體,只是將兩個(gè)不同抗體的V區(qū)集中到了一個(gè)抗體上,人們無(wú)法改變V區(qū)的結(jié)構(gòu)。通過(guò)____技術(shù),可以對(duì)雙功能抗體的V區(qū)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造,使其更適合人類的需要。這種改造,最終還必須通過(guò)對(duì)DNA分子的改造來(lái)完成。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖ad表示不同的生物或生態(tài)系統(tǒng)。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是

A. Y表示種群密度,則ad四種野生生物的所處的營(yíng)養(yǎng)級(jí)最低的一定是d種群

B. Y表示物種豐富度,ad表示不同演替階段,則自然演替的順序?yàn)?/span>a→b→c→d

C. Y表示生物的能量,則生態(tài)系統(tǒng)ad四個(gè)種群間一定有食物鏈d→c→b→a

D. Y表示物種多樣性,ad表示四個(gè)不同類型的生態(tài)系統(tǒng)中抵抗力穩(wěn)定性最強(qiáng)的是d

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】某研究性學(xué)習(xí)小組欲研究不同濃度的生長(zhǎng)素類似物溶液對(duì)根和芽生長(zhǎng)的影響,擬用小麥種子、溫箱、培養(yǎng)皿、移液管、濾紙、尺、蒸餾水、10 mg/L 2,4-D(一種生長(zhǎng)素類似物)以及01%升汞(表面消毒劑)等完成相關(guān)研究。

1)該實(shí)驗(yàn)的原理是生長(zhǎng)素類似物對(duì)植物生長(zhǎng)有調(diào)節(jié)作用,其調(diào)節(jié)效應(yīng)與______、_________等有關(guān),用不同濃度的2,4-D處理萌發(fā)的種子,對(duì)根、芽的生長(zhǎng)有不同的影響。

2)請(qǐng)補(bǔ)充完整下面的方法步驟:

①取小麥種子,用01%升汞消毒適宜時(shí)間,再用蒸餾水沖洗若干次,置于22 ℃溫箱中催芽2 天。

②取培養(yǎng)皿若干套,并編號(hào)。向1號(hào)培養(yǎng)皿中移入10 mg/L 2,4-D 溶液10 mL,然后移出1 mL2號(hào)培養(yǎng)皿中,加9 mL蒸餾水并混勻,如此稀釋至6號(hào)培養(yǎng)皿(濃度為00001 mg/L)。除之前的這6組培養(yǎng)皿外,還需另設(shè)一組,操作為___________________________________

③在各培養(yǎng)皿中放置一濾紙圓片,選取萌發(fā)的種子10粒,合理排放于培養(yǎng)皿中,蓋上皿蓋,放在22 ℃溫箱中黑暗培養(yǎng)3d。

④測(cè)量并記錄___________。

32,4-D的調(diào)節(jié)效應(yīng)一般用一定時(shí)間內(nèi)器官長(zhǎng)度的增長(zhǎng)百分率(%)來(lái)表示。計(jì)算增長(zhǎng)百分率(%)需要獲得的參數(shù)除了實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)度以外,還應(yīng)包括_____、_____

4)請(qǐng)將本實(shí)驗(yàn)最可能的結(jié)果用曲線圖的形式表示出來(lái)___________(假設(shè)對(duì)根、芽的最適促進(jìn)濃度分別是0001 mg/L01 mg/L)。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖表示科學(xué)家采用不同方法培育良種牛的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答:

1轉(zhuǎn)基因牛”D 培育過(guò)程中,常用受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞,主要原因是_____。過(guò)程 h 常用的方法為_____

2)圖中早期胚胎處于胚胎發(fā)育的_____期,其中表示_____,表示_____,胚胎干細(xì)胞來(lái)源于_____(填數(shù)字標(biāo)號(hào))。

3)分割早期胚胎時(shí)應(yīng)注意_____。圖中 AB 牛的性別_____(填相同”“不相同不一定相同)。

4)受體母牛必須和供體牛屬于同一物種,移植后的胚胎能在受體子宮中存活的生理基礎(chǔ)是______。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】某二倍體植物的基因型為AaBbCC,這3對(duì)基因分別位于3對(duì)同源染色體上。下圖表示以該植物為親本進(jìn)行的育種過(guò)程,下列敘述錯(cuò)誤的是(

A.單倍體幼苗的基因型有4

B.個(gè)體Ⅰ的體細(xì)胞中含有2個(gè)染色體組

C.個(gè)體Ⅱ中重組類型占9/16

D.若要盡快獲得基因型為aaBBCC的純種,則應(yīng)采用圖中A→B→C過(guò)程進(jìn)行育種

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