【題目】某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、Bam_HI三種限制酶切割位點(diǎn),同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因.利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請(qǐng)回答下列問題.
(1)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用兩種限制酶對(duì)進(jìn)行切割,然后進(jìn)行連接,以保證重組DNA序列的唯一性.
(2)為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中加 , 理由是
(3)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用技術(shù),即通過兩個(gè)主要過程最終形成完整植株.

【答案】
(1)SalⅠ; HindⅢ;質(zhì)粒和抗鹽基因的DNA
(2)氨芐青霉素;重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞
(3)植物組織培養(yǎng);脫分化;再分化
【解析】解:(1)質(zhì)粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、Hindm、BamHI三種限制酶切割位點(diǎn),其中BamHI的切割位點(diǎn)位于目的基因上,用該酶切割會(huì)破壞目的基因;若只用SalI一種限制酶切割可能會(huì)導(dǎo)致目的基因與運(yùn)載體反向連接;因此在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用SalI和HindIII兩種限制酶對(duì)質(zhì)粒和抗鹽基因進(jìn)行切割,然后進(jìn)行連接,以保證重組DNA序列的唯一性.(2)選用SalI、HindIII兩種酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí),形成的重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉基因而抗四環(huán)素基因被破壞,為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素.(3)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù),即通過 脫分化和再分化 兩個(gè)主要過程最終形成完整植株.

所以答案是:(1)SalⅠHindⅢ質(zhì)粒和抗鹽基因的DNA (2)氨芐青霉素 重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉素基因而抗四環(huán)素基因被破壞(3)植物組織培養(yǎng) 脫分化 再分化

【考點(diǎn)精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術(shù)的相關(guān)知識(shí)點(diǎn),需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)才能正確解答此題.

練習(xí)冊(cè)系列答案
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(3)圖中細(xì)胞由C、H、O組成的多糖是__________________。

(4)研究細(xì)胞膜通常選擇哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞,而不選擇該細(xì)胞的主要原因是哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞_____________________________。

(5)圖甲形成的組織_______(填“是”或“不是”)很理想的鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)材料,原因是___________________________________。

(6)若圖甲、乙表示根尖分生區(qū)細(xì)胞,則不應(yīng)該出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)是[ ]______和[ ]________

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(2)根據(jù)圖2分析,SGLT1(可以/不可以)在順濃度梯度的情況下運(yùn)輸葡萄糖.當(dāng)葡萄糖濃度高于20mM時(shí),隨著葡萄糖濃度進(jìn)一步提高,小腸絨毛上皮細(xì)胞主要靠提高(自由擴(kuò)散/協(xié)助擴(kuò)散/主動(dòng)運(yùn)輸)的速率來增加葡萄糖的吸收.

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